[일반생물학실험]제한효소에 의한 plasmid DNA 절단 - 전기영동

최초 등록일
2016.04.30
최종 저작일
2016.04
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목차

1. 실험 목적
2. 실험 이론 및 원리
3. 실험 기구 및 시약
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 토의 사항
7. 참고 자료
8. 참고 문헌

본문내용

1. 실험 목적
1.1. 전기영동의 원리를 이해하고, 직접 시험관 내 plasmid DNA를 전기영동하여 본다.
2. 실험 이론 및 원리
2.1. 전기영동(=전기 이동, electrophoresis)
콜로이드입자(colloid)-입자의 크기가 2.0에서 1000nm-는 전기를 띠고 있는데, 이 때문에 콜로이드 용액 속에 전극을 넣고 직류 전압을 가했을 때 콜로이드 입자가 어느 한쪽의 전극을 향해서 이동하는 현상이 나타난다. 보통 전기 크로마토그래피라고 하기도 한다. 예를 들면 수산화철이나 수산화알루미늄 등 콜로이드 입자는 음극 쪽으로 이동하고, 황·금·은 등 금속 콜로이드나 황화물·규산 등이 분산된 콜로이드 용액에서는 입자가 양극 쪽으로 이동한다. 입자의 이동속도는 입자 계면의 전기운동학적인 전위 차이에 의해서 변하며, 전해질이 흡착하면 이 전위차의 크기가 변하므로 용액 속 전해질의 농도나 종류에 의해서 영향을 받는다. 또 입자 크기와 형태에 따라서도 변한다. 따라서 콜로이드 입자의 각종 성질이 같다고 해도 어느 하나가 다르면 전기이동으로 입자를 분리할 수가 있다. 이와 같은 방법을 이용하면 여러 분석을 할 수 있지만, 특히 단백질 분석을 하는 데 있어서 중요하다.
2.1.1. 겔 전기영동(gel electrophoresis)
DNA나 RNA, 단백질과 같은 큰 분자들을 겔 매트릭스에 전류를 흘려보내 크기에 따라 서로 분리하는 기술이다. 겔은 콜로이드(colloid) 용액이 굳어진 상태를 말하는 것이다. 겔 전기영동은 전류를 흘려주어서 전하를 가진 입자가 겔 내부에서 이동하여 분리되도록 하는 기술이다. DNA나 RNA의 경우 주로 아가로즈(agarose)를 사용하고, 단백질의 경우 폴리아크릴아마이드(polyacrylamide) 등을 굳혀서 겔을 만든다. 구조나 크기 등 입자의 성질에 따라서 겔을 통과하여 이동하는 속도가 달라진다.

참고 자료

일반생물학실험(제2판), 한양대학교 분자생명과학부 저, 한양대학교 출판부, Chapter 13.유전체 DNA 정제 및 확인 中 Ⅱ.전기영동 및 아가로스 젤 만들기
일반 생물학실험, 김경진, 권준영, 김연욱, 권혁추, 권혁빈 저, 지코사이언스, 실험 19.전기영동과 DNA 관찰
임상 분자생물학, 김은중, 엄용빈, 김지용, 이재식, 박기호 저, 고려의학, Chapter 03.중합효소 연쇄반응법 中 5.DNA 젤 전기영동
Global Information Korea http://www.giikorea.co.kr/korean/bf37488-dna-molecular.html

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