plasmid DNA 분리(+Isoprophanol,solⅠ,Ⅱ,Ⅲ,EDTA 등 시약의 역할)

목차

1.Title
2.Purpose
3.Introduction
4.Discussion
5.Reference

본문내용

chloroform(클로로폼)을 사용하는 이유는 얻어진 유기물을 추출하기 위해서 사용한다.
그러므로 물을 사용하여 충분히 유기층을 씻어주면, 반응하고 남은 염화물을 제거 할 수 있고 유기층만 추출하여 원하는 결과물질을 전부 얻을 수 있다.
Isopropanol은 단백질과 DNA를 분리해 주는 역할을 한다.
이전에 sol Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ를 넣어서 핵막을 파괴하고 단백질을 변형시키고 등등의 활동을 한 뒤에 isopropanol을 넣고 원심분리 하게 되면 두 층으로 나누어 지게 된다.
하나는 단백질이 든 페놀용액과 하나는 DNA가 있는 층으로 분리된다. 또 다른 용액으로는 100% ethanol이 있는데 isoprophanol과 같이 DNA를 농축 or침전시키는 역할을 한다.
100%EtOH(에탄올)을 넣게 되면, DNA가 탈수되면서 불용성이 된다.
그렇기 때문에 원심분리를 이용해 DNA를 분리 해 낼 수 있고 70% EtOH를 사용하는 이유는 solⅠ,Ⅱ,Ⅲ에 의해서 공급된 염(salt) 등을 제거하는 용도로 사용 된다.
washing용으로 사용하는데 100% EtOH과 salt를 사용하여 침전시킨 DNA를 washing 한다.

참고자료

· 없음