생화학실험, 세포 분화 시 morphology 관찰과 분화지수 측정 실험보고서

소개

생화학실험 세포 분화 시 morphology 관찰과 분화지수 측정 실험보고서입니다
hematoxylin staining 과정 포함입니다
만점 받은 보고서입니다 많은 참고 바랍니다

목차

1. 실험제목
2. 실험목적
3. 실험결과
4. 이론 및 고찰
5. 참고문헌

본문내용

이번 실험에서는 mouse의 C2의 myoblast와 myotube를 hematoxylin 염색 하여 관찰하고 융합지수를 측정하는 실험을 하였다. 우리는 이번 실험을 Hematoxylin 염색을 하여 관찰되는 핵의 양상과 morphology를 비교하여 근원 세포와 근관 세포의 차이점을 파악하고 myogenesis를 이해하는 데 목적을 두었다. 그리고 핵의 수를 계수하고 융합 지수를 측정하여 시간에 따른 myogenesis의 진행 상황을 알아보았다.
Hematoxylin은 중남미에 있는 Hematoxylon camp- echianum 이라는 나무에서 추출된 물질로서 보통 3분자의 H2, O와 결합한 무색 또는 담갈색의 결정이다. 헤마톡실린이 산화되면 헤마실린이 되며 이 헤마실린이 도토류와 같은 염기와 결합하면 발색성을 획득한다. 세포중에 산성물질이 많은 부분(핵이나 조면소포체 등)은 이와 같은 원리로 자색으로 염색된다. 세포의 핵 안에 들어 있는 염색체는 DNA로 이루어져 있는데, DNA는 전체적으로 음전하를 띠는 분자이다. 그런데, 이때 세포에 hematoxylin을 떨어뜨려주면 붉은색을 띠고 있는 양이온이 음전하를 띠고 있는 염색체에 끌려가게 되어 염색체 전체가 붉게 물든 것처럼 보이게 된다. 그리고 염색체가 핵 안에 존재하기 때문에 핵이 염색된 것처럼 보이기도 한다. 염색을 하는 이유는 현미경으로 세포를 관찰할 때 좀 더 뚜렷하고 정확하게 보기 위해서이다.
우리가 실험에 사용한 C2는 mouse의 myoblast cell line이다. 세포 배양 시 DMEM 배지에서 자라며 adherent 상태로 성장한다. 분화가 가능하며 myoblast의 분화를 관찰하기에 유용한 세포이다. 현재 실험에 많이 이용되고 있는 세포 주이다. 세포주(cell line)는 조직으로부터 세포를 분리해서 순수 배양하여 계대 배양해 나갈 때의 세포계의 각 개체이다. 이 때 세포주는 유전적 형질에 의해 다른 주와 구별할 수 있으며, 또 계대 배양하여도 그 형질은 유지되어야 한다.

참고자료

· Eric P. Widmaier, Hershel Raff, and Kevin T. Strang, Vander’s Human Physiology, McGrawHill, 2009, p.286~287.
· Reece, Urry, Cain, Wasserman, Minorsky, and Jackson, Campbell Biology, Pearson, 2012, p.1103~1112.
· “Hematoxylin”, 『한국현대시 사전』, 농촌진흥청.
· Wikipedia, “Myogenesis”, <http://en.wikipedia.org/wiki/Myogenesis>