아주대학교 생화학실험,immunostaining,면역염색법,면역형광염색법,f-actin염색법

소개

생화학실험 immunostaining 면역 형광 염색법에 대한 자료입니다.

목차

Ⅰ. <실험목적>

Ⅱ. <이론>
1. 면역염색법
2. 면역 염색법의 원리
3. 항원의 정의

Ⅲ. <결과>

Ⅳ. <고찰>

Ⅴ. <참고문헌>

본문내용

<실험목적>
C2 myoblasts와 myotubes 세포의 세포골격을 면역염색의 일종인 F-actin 염색법을 이용하여 염색하고 그 원리를 이해한다.
면역염색법
면역염색은 항원항체 반응을 이용한 세포 또는 조직 염색법이다. 통상적으로 사용하는 헤마톡실린-에오신 염색법 등은 세포내의 염기성물질(아미노산 등)이나 산성물질(핵산 등)과 결합하여 세포를 염색하기 때문에 특이적인 염색이 불가능하다. 반면에 면역염색법은 항원항체 반응을을 이용하여 원하는 특정구조에 대하여 특이적인 염색이 가능하다.
면역염색법의 원리
면역염색법은 크게 직접법(Direct methods)과 간접법(Indirect methods)으로 나누어진다. 직접법은 형광물질이나 발색제가 표지된 1차 항체를 사용하여 항원항체반응으로 염색하고자 하는 부위를 가시화한다. 1차 항체만을 사용하기 때문에 비특이적반응이 적고 염색의 조작이 간편하지만 염색감도가 낮다.

<중 략>

결과 사진을 보면 mb와 mt 세포의 차이를 확연히 알 수 있다. mb는 mt로 분화하기 전인 세포이기 때문에 세포 골격도 아직 완전히 잡히지 않았고 세포를 지지할 만큼의 복잡하게 엉킨 구조를 하고 있지도 않다. 섬유들이 이제 막 뻗어져 나가는 단계이기 때문에 뭉쳐있어서 밀집도가 높아 보이지만 세포 골격이라 부르기에는 이른 단계이다. mt 세포로 분화하고 난 사진을 보면 골격이 훨씬 잡혀있는 것을 볼 수 있다. 발광이 좀 흐리지만 미세섬유가 길게 늘어서 있는 점이 눈에 띄고 mb 세포보다 복잡한 구조가 되어있는 것도 관찰 할 수 있다. 섬유의 수도 훨씬 많아졌고 mb 세포일 때 단순히 뻗어나가기만 한 것에 비해 mt 사진에서는 섬유가 뻗어나감과 동시에 각각의 다른 섬유들과 엉키고 연결된 모습이다.

참고자료

· George B. johnson외, 생명과학, 전병학, 계명찬, 김애리 역, 동화기술, 2007
· Russell 외, 생명과학, 홍영남 역, 라이프사이언스, 2008
· Tamm, Lukas K, Protein interactions, Johnwiley&Sonslnc, 2007