단백질정기영동 결과보고서

목차

1. 실험원리 (Introduction)
2. 실험목적 (Purpose)
3. 실험방법 (Method)
4. 실험결과 (Result)
5. 고찰 (Discussion)

본문내용

1. 실험원리 (Introduction)

1) 원리
단백질은 각각 자신의 독특한 질량과 pI 값이 있다. SDS-PAGE는 이 두 요소 중에서 질량의 차이를 이용한 분리방법으로, 먼저 SDS라는 detergent를 이용하여 모든 단백질이 동일한 (-) 전하를 띄도록 만든 후 질량에 의한 polyacrylamide gel 상에서의 이동속도 차를 이용하여 분리하게 된다. 이 때 sample buffer에 DTT나 mercaptoethanol이 첨가되어 있어 disulfide bond도 끊어지게 되어 단백질은 일차구조를 형성하여 이동하게 된다.

2)SDS의 작용
SDS(Sodium Dodecyl Sulfate)는 amphipathic의 특성을 가지는 대표적인 detergent로서 단백질과 가장 강력한 결합력을 보인다. 일반적으로 단백질을 구성하는 아미노산 2개에 SDS가 1개 정도가 결합하게 되어 단백질들은 고유의 전하를 다 잃어버리고 SDS에 의해 (-) 전하를 띄게 된다. SDS의 작용으로 denatured된 단백질은 막대기처럼 펼쳐진 상태로 acrylamide가 이루는 그물구조를 통과하게 된다. 따라서 크기가 큰 단백질일수록 그 길이가 길어 그물구조를 빠져 나오는데 시간이 오래 걸리기 때문에 이동속도가 느려지게 되고 이를 통해 단백질들이 분리가 되는 것이다.

3) Acrylamide gel
Acrylamide gel은 DNA 또는 단백질의 전기영동에 이용될 수 있는데, 특히 단백질의 경우는 SDS (sodium dodecyl sulfate)를 포함한 SDS-PAGE(polyacrylamide gel electrophoresis)를 실시한다. Polyacrylamide gel은 acrylamide 측쇄 기능기가 N, N'-methylenebisacrylamide와 같은 2개의 기능기를 가지는 화합물에 의해 교차연결(cross-link)되어 형성된 polymer이다.

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참고자료

· 없음