생화학 박층 크로마토그래피 실험

목차

I. 서론
II. 실험방법
III. 결과
IV. 토의
V. 결론
VI. 인용문헌

본문내용

[ SUMMARY ]
; Thin layer chromatography는 매우 편리하고 간결한 확인/정성시험이다. Chromatography를 할 시에 어떤 전개용매를 사용하느냐에 따라 제각기 다른 물질을 확인할 수 있다. 따라서 우리 조는 전개용매에 따른 Rf값을 비교하고, 어떠한 전개용매를 사용하는 것이 TLC에 효과적인지를 알기위해 시험했다. 최적의 분리능을 자랑하는 Rf값은 0.1~0.3 이다. EA를 단일용매로 실험했을 때 Rf값이 0.26으로 나왔지만, 단 일용매의 경우 분리능이 떨어지기 때문에 ACN과 EA를 적절히 섞어 Rf값을 0.3~0.5에 맞추기 위한 2차 실험을 한 결과, ACN:EA를 1:110 또는 1:120으로 섞는 것이 물질분리에 효과적임을 알 수 있었다.

I. 서론

1. Thin Layer Chromatography
1) 정의: 신속성, 편리성으로 많이 사용하며 정성·확인시험에 주로 사용된다. Column의 길이가 길어질수록 분리능이 증가한다. 유리판 위에 얇게 흡착제의 층을 만들어 이것에 용매를 지나가게 하여 분리한 다. 그러나 흡착제로는 실리카겔ㆍ산화알루미늄ㆍ섬유 소말ㆍ이온 교환 셀룰로오스 등이 쓰인다. 종이 크로마토그래피와 같은 목적으로 사용한다. 이 방법은 종이 크로마토그래피에 비해 전개 시간이 짧고, 강산이나 염기 등 강렬한 시약 등을 발색 시약으로 사용할 수 있는 특징을 지니고 있다. 유기 화합물의 분리ㆍ정제ㆍ정량, 순도 검정, 무기 이온 분석 등 응용 범위가 매우 넓다.

2. 전개용매선택
1) 극성/비극성 용매로 먼저 전개한 후 Rf값을 구한 후 용매의 유전율을 구하여 조금씩 바꾼다.
2) Rf 값은 0.1~0.3이 가장 분리가 잘되나, 실험 시 어려우므로 0.3~0.5가 되는 용매를 전개용매로 한다.
0.5이상은 물질이 분리되지 않고 한꺼번에 올라온다.
3) 단일용매는 분리능이 떨어지므로 알맞은 용매를 적당한 비율로 섞어 전개용매로 사용한다.
4) Column시 분리하고자 하는 물질만 가장 빨리나오거나 가장 느리게 나오는 용매를 전개용매로 사용한다.

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참고자료

· BRIC (http://bric.postech.ac.kr/)
· 한민족과학기술자네트워크 (https://kosen21.org/)