Chromosome에서 genomic DNA 분리/ 분석 실험 보고서

목차

1. 실험 제목
2. 실험 원리
3. 실험 재료
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. 논의 및 결론 고찰
7. 참고문헌

본문내용

1. 실험 제목 :
- Mammalian DNA isolation
1주차) 간세포에서 추출한 DNA 분리/ 제한효소 반응
2주차) DNA 전기영동분석 / vector DNA : Plasmid 형태

* 실험 목적 : Chromosome에서 genomic DNA 분리/ 분석

2. 실험 원리
->실험 이론
DNA 분리.
DNA 분리를 위해 동물세포는 세포막을 제거하고 핵막을 제거한 후 , 단백질과 RNA를 분리해내어 DNA를 취할 수 있다. Plasmid 같은 경우에는 Chromosomal DNA보다 작으며 세포내에서 다른 DNA로부터 분리가 쉬우며 다른 생물체로의 형질전환이 가능하므로 유전자 조작에서 Vector DNA로 널리 사용된다. Plasmid의 정제를 위해서는 우선 plasmid를 지니는 세포를 액체배지에서 배양, 세포벽 및 막을 제거하여 Cell을 Extract 상태로 만들고 단백질과 염색체 DNA를 제거하고 에탄올 침전으로 DNA을 응축하여야 한다

<중 략>

8) 600
mu l의 isopropanol을 첨가한다.
9) 600
mu l의 70% Ethanol을 넣어(washing) 섞는다.
(1~5분.max speed)
10) 상등액을 버리고 pallet에 남아 있는 물기제거를 위해 air dry한다.
11) 5분정도 공기 중 방치한 후 Buffer or 증류수 20
mu l,50~100
mu l를 넣는다.

-> 제한효소 반응 (Ecor1이라는 제한효소로 간 조직에 있는 genomic DNA를 잘라서 밴드 확인)

참고자료

· 생화학 실험
· http://blog.naver.com/kdrbiotech?Redirect=Log&logNo=109546412