PLD를 이용한 PC의 가수분해(결과)

목차

1. 실험목적
2.시약 및 기구
3.실험방법
4. 결과
5. 토의
6. 감상

본문내용

5. 토의
이번 실험은 Phosphatidyl chloline(PC)을 Phospholipase D(PLD)를 이용하여 가수분해 시키고, 그 산물인 Phosphatidic acid(PA)와 Choline을 TLC를 통해 확인해보는 실험이었다. 이 실험은 앞서 진행했던 2가지 실험과 이어지는 실험으로 첫 번째 실험에서 만들었던 PC와 두 번째 실험에서 만들었던 PLD를 모두 사용하여 진행하는 실험이다. 우리 실험 결과를 보면 PC는 점차 줄어드는 것이 확인되었으나 PA는 보이지 않는다.
일단 실험방법부터 살펴보면 제일 먼저 buffer solution을 만들어준다. buffer solution은 산, 또는 염기가 첨가되었을 때 용액의 pH가 거의 변하지 않는 용액이다. 완충작용을 하는 용액이다. 플라스크에 0.28 mL CH3COOH을 넣고 0.55g CaCl2를 혼합하여 준다. CH3COOH가 매우 소량이므로 3ml의 증류수를 더 첨가하여 녹여주었다. pH를 5.6으로 맞추어주기 위해 1M의 NaOH를 만들어주었다. 정확한 농도의 용액이 필요한 것이 아니기 때문에 대략 200ml의 증류수와 10g의 NaOH를 넣어서 용액을 만들어주었다. 그리고는 pH meter를 사용하여 pH를 적절하게 맞추어주었다. pH meter는 예전에 분석화학실험 때 사용해봤었는데 그 때 보정하느라 엄청 애먹었던 기억이 있어서 다시 보정을 하라면 어쩌지 하고 걱정했는데 사용설명서에 1주일에 한번만 보정하면 괜찮다고 되어있어서 조교님도 안해도 될것같아 하여 그냥 바로 pH를 측정하였다. 처음에 NaOH를 약간 넣어주었을 때는 pH가 4정도까지 가서 그담에 조금 더 넣어주었는데 pH가 계속 오르더니 5.66에서 멈추었다. pH차이가 크지 않으므로 여기서 문제가 생기지는 않았을 것이다. 여기에 증류수 47ml를 더 넣어주었다.

참고자료

· 없음