Cell harvest

최초 등록일
2013.04.05
최종 저작일
2013.04
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본문내용

① dish를 가져와서 액체배지를 부어 버린다. (50ml 튜브 준비)
② PBS Washing(위에서부터 잘 뿌려준다)
③ Stripper로 잘긁어 모아서 50ml 튜브에 넣는다.(이때 cell의 물리적 손상은 신경 쓸 필요가 없다. 어짜피 단백지를 추출하기 위함이기 때문)
④ spin down(cell전용 RPM이 낮은걸로 사용)시키고, lysis buffer를 준비한다.
protease inhibitor(냉동실에 있음) 500ul, RIPA buffer 400ul, phosphatase inhibitor 100ul
⑤ Voltexing 후 냉장고에 10~10분 정도 넣어둔다. 중간에 한번 votexing
⑥ centrifuge 13000RPM, 4℃, 12분(미리 전원을 넣어 4℃에 맞춰둔다.)

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