gram 염색법

소개

자세한 설명과 꼼꼼한 discussion으로 A+ 받은 실험보고서 입니다.

목차

1. 서론
2. 실험목적
3. 실험 재료 및 기구
4. 실험 방법
5. 실험 결과
6. Discussion
7. Further Study
8. 참고문헌

본문내용

1. 서론

(1) 그람 염색이란 무엇인가?
1884년 덴마크 의사 Christian Gram이 고안했던 특수한 염색법이며, 그람 염색 시 자주색으로 염색되는 세균을 그람양성세균, 붉은색으로 염색되는 세균을 그람음성세균으로 분류한다.

(2) 그람 염색법
Gram 염색 술식에 있어 1차로 쓰이는 crystal violet을 건조·고정된 세균 도말표본에 가했을 때, Gram 양성균이나 Gram 음성균이 다 같이 일단은 crystal violet색에 착색된다. 이와 같은 현상은 색소의 염기군과 세포의 산성군 사이에서 일어나는 이온 결합에 의한다. 시약 중의 iodine-potassium iodide액은 매염제(mordant)의 구실을 하는데 Gram 양성 및 음성 균세포 내에서 색소와 작용하여 일종의 침체현상을 일으켜 색소의 부착을 촉진한다.

<중 략>

한편 그람 음성균의 세포벽은 얇고, 단백질 mucopeptide와 지질의 여러 가지 복합층으로 구성되어 있다. 그람 양성균에 에탄올을 처리하면 지질(liquid)이 용해되면서 1차 색소(crystal violet)도 함께 씻겨버린다.

이 외에 균 내부에 존재하는 탈색제 차단물질의 유무에 따라서 염색여부가 결정된다는 설도 있다. 이에 따르면, 염색은 균의 세포벽에 있는 magnesium ribonucleate의 유무에 따라 좌우되는데, 그람 음성균은 이 물질이 없기 때문에 탈색이 되는 것이다. 반대로 그람 양성균은 균의 세포벽에 있는 magnesium ribonucleate가 탈색제가 작용하는 것을 막아, crystal violet이 탈색되는 것을 억제해서, 세포벽은 보라색으로 남아 있게 된다는 이론이다. 주의해야 할 점은 그람 염색 과정에서 탈색제인 에탄올을 처리하는 시간이 너무 길어질 경우 그람 양성균이 그람 음성균처럼 보이게 될 수 있다. 마지막으로 후염색소(counter stain)로 사용되는 safranin은 에탄올에 의해서 탈색되어진 세균의 세포벽에 착색되어, 세포가 적색으로 보이도록 한다. 이를 그람 음성균이라고 한다.

참고자료

· http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/8/87/Michaelis-Menten.png
· Campbell Biology 8th
· http://search.naver.com/search.naver?sm=tab_hty.top&where=nex12
· http://100.naver.com/100.nhn?docid=17332
· http://blog.naver.com/lekodanhong?Redirect=Log&logNo=80127922566