[수의미생물학] 협막염색과 음성염색

소개

[수의미생물학] 협막염색과 음성염색

목차

1. 실험제목
2. 실험목적
3. 배경이론
4. 실험결과
5. 고 찰
6. 참고문헌

본문내용

1. 실험제목
세균 염색 - 협막염색과 음성염색

2. 실험목적
협막염색과 음성염색의 세균염색법에 관해 알아보고, 실험을 통해 세균의 도말, 고정 및 염색을 해봄으로써 그 특성을 이해한다. 또한 기본적인 세균의 모양, 크기 배열을 감별한다.

3. 배경이론
미생물 균체는 크기가 미세하고, 액체배지에 현탁되어 있으면 투명하거나 색깔이 없기 때문에 살아 있는 상태로 관찰하기는 대단히 어렵다. 따라서 이들의 형태와 특징을 관찰하기 위해서는 염색하여 현미경으로 관찰하여야 한다. 염색은 세포의 형태학적 특성과 세 포구조를 관찰하는데 도움을 준다.

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▲ 실험방법
-Antony`s method
① 염색방법 skim milk에 배양된 균액을 깨끗한 slide 위에 1~2 loop을 얇게 도말한다.
② Slide를 불꽃에 대지 말고 공기 건조하여 고정한다.
공기조정을 하면 부착력이 약해 염색 및 수세 시 흘러내려가기 때문에 정상 혈청 한 방울과 균액을 혼합하여 도말하면 좋다.
③ 1% crystal violet 용액으로 2분간 염색한다.
④ 20% copper sulfate 용액으로 염색액을 세척한다.(물로 세척하지 않음)
⑤ 여과지로 물기를 건조시키고 immersion oil로 관찰한다.

<중 략>

⑬ 수세(washing) : 수돗물로 간접 세척한다.
⑭ 탈색 : 알코올 용액을 떨어뜨리고 약 30초간 탈색한다.
⑮ 수세(washing) : 수돗물로 간접 세척한다.
대조염색 : 사프라닌 액으로 30초~1분간 염색한다. (그람 음성 세균은 분홍색으로 염색된다.)
수세(washing) : 수돗물로 간접 세척한다.
건조여지(blotting paper) : 도말표본 위의 물기를 제거한다. (여지를 슬라이드 위에서 비비지않는다.)
검경(microscopic observation) : 염색한 도말표본 위에 유침수(immersion oil) 한 방울을 떨어뜨린 후, 유침대물렌즈로 표본 을 관찰한다.

참고자료

· Cappuccino, 2005, Microbiology, 7th, PEARSON, San Francisco, P 53-87
· 김영권 외, 2001, 미생물학실험, 2nd, 고려의학, 서울, P 23, 57-92
· 한국미생물학회, 1998, 미생물학실험서, 1st, 을유문화사, 서울, P 11-48
· 미생물학 ; 역자 김영민외 8인 ; 라이프사이언스 ;p 72-75, p 570-572