Plasmid DNA와 Chromosomal DNA 분리 및 정량,순도측정

소개

Chromosomal(염색체) DNA와 Plasmid(플라스미드) DNA를 분리하고
분리한 DNA의 정량과 순도를 측정한 실험을 기술한 레포트입니다.
다른 레포트와 차별되게 "논문" 형식으로 작성하였습니다.

목차

I. Introduction - 실험에 대한 원리와 배경, 목적등을 기술
II. Method - 실험에 사용한 재료, 기구, 방법등을 기술
III. Result - 실험 결과를 기록
IV. Conclusion & Discussion - 실험 결과에 관한 해석 및 고찰
V. Reference - 참고문헌

본문내용

Abstract:
B-6 strain은 gram positive bacteria로 균주 내에 들어있는 chromosomal DNA를 추출하기 위해서 negative bacteria 방법에서 추가적으로 lysozyme 처리를 하여 cell wall을 보다 효과적으로 lysis 시킨 후 chromosomal DNA를 추출하였다. 그리고 plasmid DNA는 pBR322를 가지고 있는 bacteria에서 추출하였다. 그리고 UV spectrophotometer를 이용하여 각각 추출한 DNA를 정량하고 순도를 측정하였다.

I. Introduction
DNA란 생물체의 유전정보를 함유하고 있는 물질로 deoxyribonucleic acid의 약자이다. 생물체가 n세대로 자손이 계속 번식하면서 부모가 가지고 있는 특성들을 meiosis를 통하여 Ova-ry(maternal), sperm(paternal)의 형태로 각각 n개씩 나누어지고 이들이 수정을 통해 2n개가 되면서 자손이 물려받게 되는 것이다. 초기 유전정보를 함유한 물질로 protein과 DNA, RNA가 대두되었으나, 1952년 Alfred Hershey와 Mar-tha Chase의 T2 phage를 이용한 실험을 통해 DNA가 유전물질임이 최종적으로 증명되었다[1].
DNA의 종류는 크게 3가지로 나눌 수 있는데 첫 번째, chromosomal DNA, 두 번째, genomic DNA, 세 번째, plasmid DNA이다. 먼저 chromosomal DNA는 DNA중 가장 큰 단위로, 생물체가 가지고 있는 전체적인 DNA으로 물질대사와 증식에 필요한 정보가 함유되어 있으며 세균의 major DNA이다. Histone으로 불리는 protein에 DNA가 감겨있는 형태로 존재한다. Genomic DNA는 생물체의 모든 유전정보를 가지고 있는 DNA를 일컫는 말이다. 대부분 생물체의 유전체는 DNA로 되어있으나 virus는 RNA genome을 가지고 있다. Genomic DNA는 일반적으로 크고, chromosome내의 DNA-prot-ein complex으로 존재한다. Plasmid DNA는 생물체 내에 독립되어 있는 DNA으로 자가 복제가 가능하다. 또한 genomic DNA가 가지고 있지 않은 생물체의 특성을 가지고 있고, 크기가 다소 짧은 편이며 환상형 구조로 되어 있다.

참고자료

· Independent functions of viral protein and nucleic acid in growth of bacteriophage. Hershey A, Chase MJ Gen Physiol 36 (1): 39–56. 1952.
· The structure of yeast nucleic acid. Levene P, J Biol Chem 40 (2): 415–24. 1 December 1919.
· A Structure for Deoxyribose Nucleic Acid. Watson J.D. and Crick F.H.C. Nature 171 (4356): 737–738. 1953.
· Proteinase K from Tritirachium album Limber. Ebeling W, Hennrich N, Klockow M, Metz H, Orth HD, Lang H. European Journal of Biochemistry 47 (1): 91–97. 1974.