Indirect ELISA

소개

실험레포트

목차

I. Title

II. Introduction

III. Materials & Equipments

IV. Methods

V. Result

VI. Discussion

VII. Reference

본문내용

I. Title : Indirect ELISA(Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay)

II. Introduction
- 항원 (Antigen)
이종 동물체내에 들어갔을 때 그와 특이하게 반응하는 물질(항체)을 생산하게 하는 것으로서 근래에는 면역원(immunogen)이라고도 한다. 즉 항체를 만들 수 있는 항원성(antigenicity)과 형성된 항체와 반응하는 반응특이(specific reactivity)을 가짐을 특징으로 한다.
- 항체 (Antibody)
항원(외부에서 온 물질)을 파괴하기 위해 특별한 림프구가 만들어 내는 단백질. 주로 세균, 바이러스, 기타 미생물이 여러 가지 항원을 함유한다. 항원 자극후 생성되는 면역글로불린(Ig)으로 항원과 특이적으로 반응한다.
- ELISA(Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay)
효소와 관련된 면역화학 검사로 단백질의 항원적 요소를 검출하는데 널리 이용된다. 이 요소는 호르몬, 항원, 항체 등을 포함한다.

<중 략>

- e-tube와 같은 다른 플라스틱에는 흡착되지 않지만, ELISA전용 96well plate에는 흡착되는 원리?
hydrophobic interaction에 의해서. hydrophobicity가 낮으면 pH를 높이거나 해서 이를 증가시킨 후에 흡착시키는 원리이다.
- PBS와 PBST의 차이?
PBST는 PBS에 Tween-20이라는 detergent가 더해졌다. 이는 washing과정에서 주로 쓰이며 nonsepcicif interaction하는 물질들을 제거하는데 쓰인다.
- antibody를 넣기 전, 잔여물을 제거하는 이유?
기존의 잔여물을 완전히 제거해야만 항원-항체반응에 의한 결과인지 잔여물들과 항체의 반응에 의한 결과인지 명확히 할 수 있기 때문이다.

참고자료

· http://blog.naver.com/eejddks?Redirect=Log&logNo=50101955063
· 네이버백과사전, http://terms.naver.com/entry.nhn?docId=499996
· http://www.piercenet.com/browse.cfm?fldID=B7A12FF1-5056-8A76-4E61-1FA4DCEB16EC