[생물학 실험보고서] Xenopus의 발생과 축 형성

소개

Xenopus의 발생과 축 (axis)의 형성을 관찰하는 실험입니다.

목차

1. Introduction

2. Materials

3. Method

4. Discussion

5. Data

6. References

본문내용

Introduction
아프리카산 무미양서류인 Xenopus laevis 는 다른 양서류에 비해 난자 또는 수정란을 계절과 무관하게 쉽게 구할 수 있고 실험실에서의 성체사육이 가능하며 발생속도가 빠르고 실험적 조작에 잘 견딘다는 장점 때문에 유용한 실험동물로서 이용되어 왔다. 양서류의 난자는 구형이며 성체에서 나타나는 3개의 축(전-후, 좌-우, 등-배)은 발생과정을 통해 결정된다. Xenopus의 수정란은 수정된 직후 제1난할 시기에 수정란의 피층이 내부세포질에 대해 약 30도 이동하는 피층회전이 발생한다. 이에 의해 동물 반구의 피층은 정자 침입점으로 이동하는데, 수정란 중간대(회색)의 표면을 덮고 있는 멜라닌 색소층의 이동에 의해 중간대의 세포질이 노출되면서 생긴 부분이 회색신월환이다. 정자침입점은 embryo의 복측이 되고 회색신월환은 배측이 되며, 64cell 이후 blastula(포배기)에 접어들게 된다. 포배기(blastula)가 되면 할강이 동물반구에 치우치고 표면과 할강사이에 여러 층의 세포가 존재하는 모습을 띠는데, 이것은 대부분의 양서류수정란이 포배기에 도달했을 때 보이는 양상이다. Xenpus 자체만의 포배기의 특징으로 외배엽은 동물극 표면에 위치하며, 중배엽은 중간대의 바깥층에는 없고 안층에만 존재, 내배엽은 중간대 바깥층과 식물극 표면을 차지하는 모습을 볼 수 있다.

<중 략>

Method
1. 실험 전 교배 중인 암수 Xenopus 를 관찰 (사육실 방문 또는 암수 한 쌍을 비커에 보관)
2. Dejelly 되지 않은 수정란을 모아서 준비. 조당 50ml tube 하나에 알을 절반 정도로 채움.
3. 2% cysteine-HCl (pH8.0) 용액과 0.1x MMR 을 이용하여 dejelly 및 wash 수행. petri dish 는 조 당 6개씩 분배. 5개의 dish 에는 반과 조를 확실히 표시한 뒤 각각 LiCL,
10% MMR(control), 100% MMR, 200%MMR, 400%MMR로 표시할 것. 표시가 끝나면 50yg/ul 의 농도로 gentamycin 투입

참고자료

· 정해문 외 3인, 발생생물학의 이해, 2001, 교학연구사, pp72-117