[생물학 실험보고서] Direct PCR 방법을 이용한 GMO 판별

소개

Direct PCR을 이용하여 GMO를 판단하는 실험으로서, GMO인지 여부를 판단할 수 없는 5개의 실험군을 Dongjin (야생형)을 Negative control로, hph 유전자가 들어있는 Plasmid를 Positive control로 하여 실험을 하였습니다.

목차

Abstract

Introduction

Materials and Methods

Discussion

Discussion

본문내용

이번 실험은 Direct PCR을 이용하여 GMO를 판단하는 실험으로서, GMO인지 여부를 판단할 수 없는 5개의 실험군을 Dongjin (야생형)을 Negative control로, hph 유전자가 들어있는 Plasmid를 Positive control로 하여 실험을 진행하였다. 실험 결과, Direct PCR을 이용하여 얻은 각 실험군의 DNA는 실험군 A, B, D, E가 Positive control과 동일한 Band pattern을 보여 hph 유전자가 삽입된 GMO로 판단할 수 있고, Negative control과 같이 Band가 나타나지 않은 C는 GMO가 아닌 것을 알 수 있었다.

Introduction
GMO는 유전자변형생물체(Genetically Modified Organism)으로서 LMO(Living Modified Organism)이라고도 하며, 생명공학 기술을 이용하여 인위적으로 새롭게 조합된 유전 물질을 가지도록 변형된 동물, 식물 또는 미생물을 의미한다. 최근 유전자변형생물체는 여러 가지 용도로 활용되고 있는데, 그 대표적인 예는 다음과 같다. 제초제저항성이나 해충저항성을 가진 농작물 및 식물, 의약물질 생산이나 유익한 물질을 생산하는 동물과 고기능 효소를 생산할 수 있는 미생물 등이 그것이다. 이렇게 유전자를 변형시키는 방법을 Mutagenesis라고 한다. 분자생물학의 연구에서 주로 사용하는 Mutagenesis 방법은 바로 Site-directed mutagenesis이다. 이것은 특정 DNA 염기서열을 변화시킴을 의미하는, 분자생물학에서 중요하게 이용되는 분야로서, 어떤 단백질의 기능부위를 연구할 때에 의심되는 부위의 아미노산을 다른 아미노산으로 치환 혹은 제거한 다음 기능의 변화를 관찰함으로써 기능부위를 규명할 수 있는 것이다. 또 DNA 재결합 시 필요한 제한효소 절단부위를 만들거나 소실시킬 때 사용되기도 한다.

참고자료

· Watson 외 5인, Molecular biology of the gene, 2008, 6th ed., CSHL Press, pp799~800
· Taiz and Zeiger, Plant Physiology, 2002, 3rd ed., Sinauer Associates, pp498~510
· AMANDA COTTAGE, AIPING YANG, HEATHER MAUNDERS, ROSALIND C. de LACY and NICOLA A. RAMSAY (December 2001), Protocols- Identification of DNA Sequences Flanking T-DNA Insertions by PCR-Walking, International Society for Plant Molecular Biology,
· Thomas Boulin, Mos1-mediated insertional mutagenesis in Caenorhabditis elegans, Nature Protocols
· http://biochemistry.yonsei.ac.kr/biochem_workshop/site_directed_muta.php