Microbial Staining, 미생물 염색

소개

4가지의 염색법을 통해서 미지 미생물이 무엇인지 알아보고자 한다.
이 실험을 통해 미생물의 염색 원리와 방법을 익힌다. 염색된 균을 눈으로 직접 관찰하여 어떤 종류의 균인지 분류할 수 있다.

목차

실험목적

이론
- 미생물의 분류
- 세균세포의 구조
- 염색
- 내생포자
- 미지시료 균 조사

실험재료

실험 기구 및 장치

실험방법

실험결과

참고문헌

본문내용

3. 염색
미생물들을 관찰한다는 것은 미생물들이 작고 수용액상의 배지에 있을 때 거의 투명하기 때문에 매우 어려운 점이 많다. 그래서 그러한 미생물들의 속성을 연구하기 위해서, 또 특별한 주제로 진단할 목적으로 특별한 group의 미생물들을 분류하기 위해서 미생물을 염색하게 되는데 광학 현미경으로 미생물들을 관찰함에 있어 매우 중요한 도구가 된다.

1) 염색의 의의
(1) 세균의 분류와 동정에 필수불가결한 방법이다.
(2) 검체의 세균유무와 균량을 간단히 알 수 있다.
(3) 형태로 균종이 추정할 수 있다. 따라서 그에 적절한 항생물질을 빠르게 선택할 수 있다.

2) 세균 염색 색소
세균 염색에 사용하는 염색제의 대부분은 aniline색소이고 염기성 색소와 산성 색소가 있다.
염기성 색소는 해리되어 양(+)이온으로 하전되는 색소분자를 유리하며, 산성 색소는 그 반대로 음(-)이온으로 하전되는 색소분자를 유리한다.
세균의 균체에는 핵산이 다량 함유되어 있고 그 인산기는 음성 하전이므로 양성하전의 염기성 색소와 잘 결합하여 염색된다. 한편 조직세포의 세포질은 양성하전이므로 산성 색소로 염색된다.
염기성 색소는 methylene blue, basic fuchsin, crystal violet, safranin O, bismark brown 등이 있고 염색성을 높이기 위하여 염색촉진제로서 석탄산, 수산화칼륨, 초산 등이 첨가된다. 그리고 매염제로서는 탄닌산, 피크린산, 명반, 황산제1철 및 요오드 등이 사용된다.
세포성분과 색소와의 결합력에는 강약이 있어서 목적 이외의 것에도 염색되는 일이 있으므로 일단 염색한 것을 선택적으로 탈색하는 방법이 채택되었다. 탈색제로는 alcohol, acetone, 1-3% sulfuric acid, 3% HCl alcohol 등이 쓰인다.

참고자료

· http://academic.missouriwestern.edu/jcbaker/bio251sec01/bio251_laboratory_images.htm
· http://www.uwyo.edu/molb2210_lab/lectures/lect04_f03.htm
· http://mediver.com/bbs/view.php?id=micro&page=1&sn1=&divpage=1&sn=off&ss=on&sc=on&select_arrange=headnum&desc=asc&no=15
· 한국미생물학회, 미생물학 실험, 아카데미 서적, 1998년, p.213-215
· 윤효숙, 황선철, 미생물학 실습, 대학서림, 1999년, p.139-140
· 박석기외, 최신미생물학, 신광문화사, 1995, pp. 69~72
· 미생물학 실험교재 편찬위원회, 미생물학 실험, 월드사이언스, 1995, p.74