인제 및 동물조직학 - 쥐 해부 및 절편 제작 과정

소개

인체 및 동물조직학 실험 과목에서
쥐 해부 실험후 각각의 장기를 관찰 한 다음 절편을 제작하여 조직학적 구조를 살펴본다.

목차

1. 흰쥐 마취 및 해부

2. 조직적출(신장) 및 관찰

3. 고정(Fixation)

4. 탈수

5. 포매 및 Block 만들기

6. 절편제작 및 슬라이드 글라스에 붙이기

7. 염색 : Haematoxylin & Eosin 염색법

8. 탈수(Dehydration) 및 영구포매

9. 현미경 관찰

본문내용

7. 염색 : Haematoylin & Eosin 염색법
염색 전에 먼저 조직을 PBS 용액에 분 동안 담가둔 다음 슬라이드 글라스 위에 Eosin 용액(붉은색; 세포질)을 떨어뜨린 후 3분 동안 염색한다. 3분후 흐르는 물에 슬라이드 글라스를 씻어주는데 이때 조직이 씻겨 나가지 않도록 슬라이드 글라스를 뒤집어서 씻어준다. 그다음 Haematoylin 용액(검푸른색; 세포핵)으로 3분 동안 염색한 다음 같은 방법으로 흐르는 물에 씻어준다.


8. 탈수(Dehydration) 및 영구포매
영구포매를 위해 앞에 과정서 염색된 조직을 70%, 95%, 00% Ethanol 용액에 분 동안 차례대로 담가 탈수 시킨 다음 Xylene 용액에 분 동안 담가둔다. 이 실험에서는 Haematoylin 과 Eosin 용액을 사용했기 때문에 Mounting 용액으로 Balsam(송진액)을 사용하는데 다른 실험에서는 달라 질 수 도 있다고 한다.

9. 현미경 관찰
조직 표본을 현미경으로 관찰한 후 스케치 한다.

<참고사항>
PBS 용액 ; Phosphate buffered saline PBS pH7.2-7
생물학 관련 실험에서 가장 많이 쓰이는 완충용액이다. 완충용액은 어느 정도의 산 또는 염기를 가해도 그것들의 영향을 받지 않고 수소 이온농도를 일정하게 유지하려고 하는 용액이다. PBS 용액이 중요한 이유는 첫째 이온세기를 맞추어 주는 역할을 하기 때문이다, 우리 몸은 일정농도의 이온 농도를 가지고 있다. 이온 농도가 너무 높거나 낮을 경우에는 우리 몸의 세포가 삼투막으로 되어있기 때문에 지나친 물의 흐름이 생겨 세포가 수축하거나 팽창하여 세포가 파괴될 위험이 있다. 둘재는 단순한 식염수 이외에 완충용액으로의 작용이다. 즉 인산완충용액의 기능을 더한 것이다. 이러한 완충용액은 우리 몸에서 급격한 PH 변화를 조절해 준다.

참고자료

· 없음