Observation of Microorganism using Gram`s Stain Method (미생물 그람염색)

소개

Observation of Microorganism using Gram`s Stain Method
미생물 그람염색 결과 관찰, 생명과학실험

목차

1. 실험 목적
2. 실험 재료
3. 실험 방법
4. 실험 결과
5. 고찰 (Discussion)

본문내용

1. 실험 목적
: 고체배지에서 배양한 미생물에 그람염색법을 이용하여 염색한 뒤 현미경으로 배양시 킨 미생물을 관찰해보자.
2. 실험 재료
: 배양시킨 미생물, Crystal Violet 용액, 그람 요오드 용액, 95% 에탄올, 사프라닌 용 액, 광학현미경, 슬라이드글라스, 커버글라스, 증류수, 마이크로 피펫, 피펫팁, 튜브, 이쑤시개, 실험용 티슈, 알콜램프
3. 실험 방법
① 슬라이드 글라스 위에 증류수를 한 방울 떨어뜨린다.
② 배양된 균을 이쑤시개 끝으로 떠서 슬라이드 글라스 위의 증류수에 잘 푼다.
* 너비가 가로 세로 2cm*2cm 정도의 너비로 넓게 펴야 뭉치지 않게 관찰할 수 있다.
③ 알콜램프에 그을려 건조시키며 고정을 시킨다.
* 불꽃 위에서 왔다 갔다 거리면서 그을린다. 잘못하면 슬라이드 글라스가 깨질 수 있기 때문에 주의해야 한다
④ Crystal Violet 염색액을 가하고 약 1분간 반응시킨다.(염색)
⑤ 2초~5초 정도 증류수로 washing 을 한다.
* 균이 있는 앞부분에 증류수를 흘려보내면 균이 씻겨나가므로 균이 있는 뒷부분에 증류 수를 흘려보낸다.
⑥ 요오드(iodine) 용액을 충분히 가하고 약 1분간 반응시킨 후, 다시 증류수로 2초~5초간 washing 을 한다. -> CVI 복합체 형성(착색)
⑦ 95% 에탄올을 가한다음 45초 정도있다가 증류수로 2초~5초간 washing 을 한다.
-> 지방질 용해(탈색)
⑧ Safranin 용액을 가하고 약 1분간 염색한다.(대비염색)
⑨ 마지막으로 2초~5초간 washing 을 한번 더 하고 공기 중에서 건조시킨 후 커버글라스 를 덮고 현미경(X400, X1000)으로 관찰한다.

참고자료

· 없음