[분석기기] 크로마토그래피

소개

HPLC의 도입에서 마무리 까지 한번에 끝내세요.

목차

1.크로마토그래피
2.HPLC 구성 및 용매,이동상(제조)
3.HPLC UTILITY
4.칼럼의 구성 및 선택 방법
5.C18칼럼의 CHEMISTRY
6.칼럼의 보관 및 재생법 등

본문내용

혼합된 시료성분이 이동상(Mobile phase)과 고정상(Stationary phase)사이를 흐르면서 흡착작용, 분배작용, 이온교환작용, 또는 분자크기배제작용에 의하여 각각의 단일 성분으로 분리되는 것을 말한다. 크로마토 그래피는 성분의 분리, 정성/정량등의 분석목적과 분리,정제등의 분취 목적으로 쓰인다. 이것은 20세기 초반에 개발된 비교적 새로운 방법으로 오늘날 가장 신빙성이 높은 분리기술이라 할 수 있다. 크로마토그래피에는 여러가지가 있으나 그중 liquid 크로마토그래피의 장점은 아래와 같다.
가. 분석성분의 분자량범위가 넓다.
나. 분리기작이 다양하다.
다. 비파괴적이다.
라. 유도체화 외에는 non-volitile 하다.
마. ionized,또는 ionic compound들도 분석한다.
바. 상온 근처에서 분리한다.

가. Normal phase(흡착작용, Adsorption)
칼럼내의 고정상에 극성을 가지는 Functional Group이 부착되어 있어 이것의 극성에 의하여 분리가 이루어진다. 극성도가 높은 물질일수록 늦게 용출된다. 극성도가 A>B>C인 경우 용출순서는 C,B,A의 순서가 된다. 일반적으로 Eluent는 Non-aqueous, Non-polar solvent를 사용한다.

나. Reverse Phase (분배작용, Partition)
칼럼내의 고정상에 극성이 없는 group이 부착되어 잇어 극성을 띠는 물질은 빨리 용출되고 극성이 없는 물질이 늦게 용출된다. 보통 비극성이 매우 큰 C18 기와 같은 Functional group을 silica표면에 부착시켜 고정상으로 사용한다. 보통 용매로는 Water/Acetonitrile 또는 water/methanol과 같은 극성 용매를 많이 사용한다.

참고자료

· 없음