인간배아줄기세포로 부터 세포 분화 유도

소개

인가배아줄기세포로 부터 혈관 유도세포 분화 관련 논문 요약서

목차

결과
1. 인간 배아줄기세포로부터 모세포(blast)의 생성과 특성 규명
2. 인간 배아줄기세포 유래 모세포(hES-BCs)는 hemangioblast의 특성을 가짐
3. 모세포 군락(Blast colonies)은 클론원성(clonogenicity)을 지님
4. 생쥐 망막허혈모델에서 hES-BCs의 역할
5. 쥐 당뇨망막증모델에서 hES-BCs의 역할
6. 생쥐 심근경색모델, 생쥐 뒷다리허혈모델에서의 hES-BCs의 역할

고찰

한계점

본문내용

인간 배아줄기세포로부터 hemangioblast cell을 유도할 수 있음은 이미 보고된 적이 있다. 하지만, 무혈청 배지 환경에서 hemangioblast의 대량 생산이나 그 세포의 기능평가 방법에 대한 논의는 없었다. 따라서, 우리는 무혈청 배지 환경에서, hemangioblast로 여겨지는 세포를 효율적으로, 간단하게 분리해내는 방법을 소개하고자 한다.

결과
1. 인간 배아줄기세포로부터 모세포(blast)의 생성과 특성 규명
인간 배아줄기세포로부터 모세포를 얻는 방법은 간단하게 두 단계로 이루어진다. 먼저, 인간 배아줄기세포주를 무혈청배지에서 배양하여 embryoid bodies(EBs)를 만든다. 그 다음 EBs로부터 분리한 개별 세포를 무혈청 blast-colony growth medium(BGM)에 배양한다. 배양 6일 후에, 100개 이상의 세포를 가지는 모세포 군락(blast-colony)들을 관찰할 수 있다.
모세포의 특성 규명을 위해서는 면역조직화학법과 gene profiling array를 사용한다. 면역조직화학법 결과에서, 인간 배아줄기세포 유래 모세포(hES-BCs)는 다양한 hemangioblast 관련 단백질을 발현하는 것으로 보이나, CD31, CD34, KDR은 발현하지 않았다. Gene profiling array 결과에서, SCL, LMO2와 같은 hemangioblast에 중요한 유전자의 발현이 증가된 것으로 보였다.

2. 인간 배아줄기세포 유래 모세포(hES-BCs)는 hemangioblast의 특성을 가짐
인간 배아줄기세포 유래 모세포가 조혈전구세포와 혈관내피전구세포로의 분화 잠재성을 가지고 있는가를 알아보기 위해, 모세포 군락을 현미경 상에서 분리하여 조혈 집락형성단위(hematopoietic CFU) 혹은 기능적 혈관내피세포를 형성하는지를 관찰하였다. 우리는 무혈청 methylcellulose 배지 조건에서, 적혈구계, 골수계, 대식세포계 등 다양한 계열의 조혈세포를 관찰할 수 있었다(CD235a, CD13, CD45에 대한 항체를 이용).

참고자료

· 없음