[생화학]【A+】단백질 공학

소개

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목차

서론

단백질 공학의 현황

유전자 조작에 의한 단백질 변형기술

재조합 단백질 생산을 위한 발현시스템

재조합 단백질의 분리 및 정제

전망

본문내용

1. 서론
단백질 공학?
완전히 새롭거나 개선된 기능을 가진 단백질 만들기 위한 기술
유용전자 분리기술
유전자 클로닝
유전자의 구조변경
유전자 재조합 기술
재조합 단백질 발현기술
단백질 정제기술
그 외 (X-선 결정학 생물정보학…)
기초
마이클 스미스- 부위특이적 돌연변이화
캐리 B. 멀리스 중합효소 연쇄 반응
기반
유전공학
용
2. 현황
효소의 활성부위를 변형
내열성 증가 유기용매, pH에도 안정
금속 보조기질에 대한 요구성 바꿈
기질특이성 변화
3. 유전자 조작에 의한 유전자 조작에 의한 단백질 변형기술
부위 특이적 돌연변이
단백질 공학에 가장 중심되는 핵심 단백질 설계기술
유전자의 특정 염기서열 변화
아미노산 서열 을 다른 아미노산으로 변경 기능 부위 규명
3.1 우라실을 함유한 함유한 외가닥 DNA를 이용한 방법
토머스 쿤켈에 의해 고안된방법
장점
비교적 작은수의 아미노산 치환시킬때
적은 비용
단점
우라실이 함유된 88DNA제조 해야함
3.2 Quick Change 부위특이적 돌연변이화 kit를 이용한 방법
Strantagene 회사 에서 개발
짧은 시간내 부위 특이적 돌연변이 도입 가능
3.3 유전자 진화 기술을 통한 방법
기본개념
특정 단백질 유전자에 여러방법으로 변이유도- 적당한 숙주세포에서 발현- 돌연변이 주 집단 구축- 특징 변화된 돌연변이 주 선별- 다음단계주형으로 사용
개량된단백질을 얼마나 빨리 얻나
선별은 어떻게 하나
실수유발 PCR , DNA 섞음 기법
3.3.1 실수 유발 PCR 돌연변이 화법
실수 유발 PCR 돌연변이 기법
점돌연변이를 인위적으로 도입 시켜 아미노산 서열을 무작위로 변경시키는 것.
유전자 PCR증폭시 DNA 복제의 정확도 낮아져 일부 위치에서 돌연변이 일어남
돌연변이 빈도는 염의 농도로 조절

참고자료

· 없음