전기영동

소개

전기영동에 관한 실험자료입니다.

목차

없음

본문내용

실험도구
1.5㎕ 튜브, 모근(25mg), 피펫, Buffer ATL, lncubator, 에탄올(96~100%), Column, Collection, Buffer AW1, Buffer AW2, Buffer AE또는 증류수
genomic DNA
분리 이론
DNA분자는 단백질과 다른 생체 화합물과 마찬가지로 음전하를 가진다. 그러므로 DNA분자는 전기장에서 양극으로 이동하므로 전기영동에 의해 DNA분자의 크기에 따라 분리가 가능하다. 보통 agarose, polyacrylamide 또는 이 두물질의 혼합물로 만들어진 gel은 복잡한 많은 구멍으로 만들어진 그물로 만들며, DNA분자들은 이 구멍을 통해서 양극으로 이동한다. DNA분자의 크기가 작을수록 더 빨리 이동되므로 gel전기영동으로 DNA분자들을 크기별로 분리시킬수 있다.
Gel의 조성에 따라 분리될 수 있는 DNA분자의 크기가 결정된다. 0.5cm두께의 0.3% agarose로 만든 평판형 gel은 비교적 구멍의 크기가 커서 5~60kb의 분자들의 분리에 사용되는데 이 경우 30kb와 35kb분자가 확실히 구분될 수 있다. 아주 미세한 구멍을 가진 매우 얇은gel은 1~300bp범위에 있는 아주 작은 DNA를 분리하기 위해서 사용되며, 한 염기의 길이만한 차이가 있는 분자들도 구분될 수 있다.
실험방법
1. 모든 도구를 알코올로 소독했다
-1.5튜브에 번호를 써넣었다
-모근을 잘라 튜브에 넣었다
-모근이 들어있는 튜브에 180㎕ Buffer ATL을 넣었다
2. 20㎕ Proteinase K를 넣었다
-기계로 흔들어 준다
-56‘C Water Bath이 10분간 넣었다
3. 간단히 원심분리를 했다
-5㎕ microcentrifuge tube 의 뚜껑에 있던 잔류물을 제거했다.
-3a. 200㎕ Buffer AL을 추가했다
-15초간 3번 섞다/멈추다를 반복했다
-10분동안 70`C Wather Bath에 두었다
-원심분리를 하고 뚜껑안에 있던 잔류물을 제거했다

이하생략

참고자료

· - NAVER지식인
· -http://blog.naver.com/nanomate
· -http://blog.naver.com/bob_joa
· -정문각 출판 : 동물유전학
· -NAVER지식인
· -http://blog.naver.com/nikitajun
· -Tong - rabbit93님의 유전학통