PCR 중합효소 연쇄반응

소개

DNA분석시 꼭 필요한 실험방법인 PCR 중합효소연쇄반응
쉬우듯하면서도 까다로운 실험방법~~
이자료에는 PCR에 필요한 모든 재료 방법 특징이 요점요점 정리되어 있으며 대부분 한글로 되어 있기에
이해하기도 빠릅니다 믿고 받으시기를

목차

1. PCR이란

2. PCR원리

3, PCR과정및 특징

본문내용

1)Primerset
Primerset은forward/reverseprimer라고도부르는데이는DNA의방향성과관련이있는 용어이다자세한내용은다음에언급하기로하고일단primerset은원하는targetregion의상보적strand의각5’부위의끝에있는수십basepairs정도의sequences대로인위적으로합성oligonucleotides라고이해하면된다.중요한point는상보적이라는것과3`end에서
부터Taqpolymerase가작용해새로운strand를합성해나가기시작한다는것이 다.

2)dNTPs
dNTPs는nucleicaicds(DNA,RNA)를구성하는LEGOblock같은것으로이해하면된다.중요한것은hydrogenbond가3개인GC결합이2개인AT결합보다안정적이라는것과dNTPs는단순한buildingblock의역할을하는것뿐만이아니라polymerase가nucleicacids를합성해나가는데필요한energy를제공하는역할도한다는것이다.

3)Taqpolymerase
Taqpolymerase는일반적으로thermostable혹은heat-stablepolymerase를의미하나원래는그기원이Thermusaquaticus라는미생물에서유래한polymerase를지칭하는용어이다.이enzyme은5’->3’polymerization-dependentexonucleaseactivity를가지고있고60bps/sec이속도로DNA를합성해나간다. 3.Step-by-stepreactionduringPCR
PCR에 필요한 재료

PCR과정 1
1)Pre-PCRstatus
PCR이시작되기전실온의buffercondition에서추출한DNA는안정적인 Bformdoublehelix구조를이루고있다.이추출한DNA를원본으로primer의binding과extension이일어나기때문에이를특히templates라고부르기도한다
2)Denaturation DNA의sugar-phosphatebackbonechain은phosphodiesterbond라는공유결합으로이루어져있어base간의결합인hydrogenbond보다약10배정도강한힘으로결합이되어있다.그러므로적절한energy(열)에의해서doublestrand가singlestrand로denature될때....
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참고자료

· 없음