마젠타박스에 무균배지를 만들고 애기장대배양하기

소개

마젠타 박스에 무균배지를 만드는 방법을 상세히 소개하고 애기장대를 배양하여 시기별 생장특성을 소개함

목차

실험 제목
실험 목적
실험 재료
실험 방법
실험 결과 및 논의
논의

본문내용

실험 제목 : 식물조직배양
실험 목적 : 기내배양용 무균배지를 만드는 법을 알고 애기장대 종자를 멸균하여 올바르게 심는 방법을 익힌다. 즉 식물조직배양을 위한 기본 단계를 이해하고 익숙하게 한다. 또한 4주간 애기장대가 발아하는 모습을 관찰하면서 기내배양과 조직배양에 대해 알아본다.
실험 재료 : 100ml증류수, MSpowder, plant agar, 5M KOH, 200ml삼각플라스크, 멸균테이프, 압력솥, 70%EtOH, 마젠타박스, A4용지, 애기장대 종자, 1.5ml e-tube, 종자멸균액, pipet
실험 방법 :
->기내배양용 무균배지 만들기
1. clean bench를 70% EtOH로 닦고 자외선을 켜두어 미리 소독된 클린벤치에 페트리 디쉬를 두었다. 이 작업은 미리 준비되어 있었다.
2. 100ml 증류수를 삼각 플라스크에 준비하고, 전자저울을 이용하여 MS powder 0.22g (0.5X), plant agar 0.8g(0.8%)을 준비했다.
3. 준비된 증류수에 위의 MS powder와 plant agar, 그리고 3ul 5M KOH(final pH5.7)를 삼각플라스크에 넣고 잘 흔들어 섞은 후 뚜껑을 호일로 막은 다음 멸균 테이프를 부착하였다.
4. 물을 채운 압력 밥솥에 준비된 삼각플라스크를 넣고 15분간 끓여 멸균하였다.
5. 멸균된 배양배지를 압력솥에서 꺼내어 소독을 하기 위해 실험자의 손과 삼각플라스크 외부를 70% EtOH로 닦았다.

참고자료

· 위키백과사전
· 네이버백과사전
· Ricki Lewis 외, 2009, <<생명과학 길라잡이>>, 6판, 전상학 외 역, 라이프 사이언스.