[생화학]글리코겐 정량

소개

글리코겐 정량 실험 과정 결과 및 디스커션입니다.

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결과레포트
1.Title : glycogen분리
2.Date : 2010. 9. 13
3.Name:
4.Reagent : Liver, homogenizer, 5% cold TCA solution, microtube, 원심분리기,pipette, 95% ethanol, D.W, 저울, ice
5.Method
1.냉동실에서 보관한 간을 이용했다.
2.1ml D.W를 첨가하여 slide glass로 잘게 자른 후, 5% cold TCA 용액을 3ml첨가하여 homogenization했다. (TCA는 강산이므로 주의한다.)
3.microtube에 1ml씩 담고 10000rpm 15min 원심분리 했다.
4.상등액을 새 Tube에 모았다. 이때 pippete을 이용하여 상등액의 부피를 쟀다.
5.침전물에는 위에서 사용한 5% cold TCA 용액을 2ml가하여 현탁 시킨 후, 다시 같은 방법으로 원심분리하여 상등액을 얻은다음, 앞서 모은 상등액과 합쳤다.
6.Microtube에 500마이크로 리터씩 상등액을 넣은후 2배 부피의 95% ethanol 용액을 가하여 침전시켰다.
7.10000rpm 15min 원심분리하여 침전물을 분리했다.
8.분리된 침전물에 1ml의 95% ethanol을 가하여 glycogen을 재침전 시켰다.
9.1000rpm 15min 원심분리하여 glycogen을 제외한 상등액을 버렸다.
10.oven에 건조시켰다.
6.Result
1.glycogen무게 측정 (g) : 0.886g
2.glycogen수득률(%) : 0.886/2.01234 X 100 = 44.028%
3.간전체의 glycogen 양 예측
간 전체의 무게를 2.5g 정도라고 봤을때 glycogen의 양은 2.5 X 0.44= 1.1g정도 이다.

참고자료

· 없음