DNA농도측정 및 전기영동

소개

DNA농도측정 및 전기영동

목차

1. 실험목적
2. 실험이론
1) plasmid DNA
2) 중합효소연쇄반응 (Polymerase Chain Reaction: PCR)
3) 전기영동
4) 전기영동에서 이동속도에 영향을 미치는 요소
5) 완충용액
8) 자외선 흡광도에 의한 DNA 농도 측정
3. 실험기구 및 시약
4. 실험방법

본문내용

1. 실험목적
- plasmid DNA를 전기영동을 통해 DNA를 분리하고 분리한 DNA의 농도를 측정한다.

2. 실험이론
1) plasmid DNA
- 박테리아 세포 내에서 발견되는 작은 DNA
- chromosomal DNA와 비교해 볼 때 크기가 작다 (4-100Kb)
- 스스로 복제가 가능
- 자연계에서 항생물질, 중금속, mutagen, bacteriophag등에 대한 내성 유전자를 운반, 제한 효소, unusual amino acid 생산, 복잡한 유기화합물을 분해 등의 역할을 수행
- 일부 plasmid는 접합과정(conjugation)을 통해 다른 박테리아 세포로 옮겨갈 수 있다
따라서 : 인위적으로 plasmid를 다른 박테리아 세포에 감염시킬 수 있고,
유전 형질을 쉽게 변환 시킬 수 있으며,
순수하게 분리 정제하기도 쉽다
- plasmid는 Replicator, Selectable marker, Cloning site의 3가지 공통요소를 가지고 있다
Replicator : DNA복제가 시작되는 부위
Selectable marker : 항생물질에 대한 내성을 나타내는 유전자를 encode하는 부분이며 plasmid가 전이된 세포를 selection할 수 있게 해줌
Cloning site : plasmid의 복제 능력 등에 영향을 주지 않으면서 외부 DNA를 삽입시키기
위한 제한효소 절단 부위

2) 중합효소연쇄반응 (Polymerase Chain Reaction: PCR)
- 주형 이중나선 DNA의 특정 부위를 내열성 DNA 중합효소를 사용하여 in vitro 상에서 증폭시키는 기술을 말한다. DNA중합효소는 복제하고자 하는 DNA 주형의 양쪽 말단부위에 각각 상보적으로 결합하는 올리고뉴클레오타이드 (oligoneucleotide)인 프라이머(primer)를 이용하여 해당 특정 DNA 부위를 반복적으로 복제한다.

참고자료

· 없음