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Recombinant DNA Technology 발표 자료

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최초등록일 2010.09.30 최종저작일 2009.01
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    소개

    Recombinant DNA Technology 발표 자료

    목차

    실험 제목
    Recombinant DNA Technology
    Discrimination of sex chromosome by PCR

    2. 실험 목표
    * PCR과 Gel Electrophoresis의 원리와 사용법을 이해한다.
    * 구강 상피세포에서 DNA를 추출하여 PCR 증폭하고,
    Gel Electrophoresis로 확인한다.

    3. 이론 및 원리
    * Polymerase Chain Reaction
    * Gel Electrophoresis
    * Staining DNA in agarose gels

    4. 시약 및 기기

    5. 실험 과정
    * 시료 준비
    * PCR
    * Gel Electrophoresis

    본문내용

    1985년Kary Mullis에 의해 고안되었다.

    ‘DNA 주형의 denaturation’, ‘primer annealing’, ‘polymerase에 의한 DNA 합성’의
    세 단계를 여러 번 반복함으로써 미량의 DNA 주형으로부터 원하는 DNA 부위를
    대량으로 얻는 방법이다.

    PCR의 최적 조건은 각각의 PCR 반응마다 다르며,
    최적의 PCR 효율을 위해서는 각각의 반응조건들을 맞춰 주어야 한다.

    초기 PCR 법은 매 cycle 마다 효소를 첨가하는 불편한 방법이었으나,
    90℃ 이상에서 활성을 잃지 않는 내열성 Taq polymerase를 사용하면서부터
    PCR을 자동으로 수행하는 기계의 개발이 이루어졌다.


    PCR Cycle의 개략도


    ① Denaturing at 94-96°C.
    ② Annealing at (eg) 68°C.
    ③ Elongation at 72°C
    P=Polymerase
    ④ 첫 번째 cycle이 끝남.
    ⑤ cycle이 반복되면서
    특정부위의 DNA가
    증폭됨.

    참고자료

    · 없음
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