피펫(pipette)사용법, PCR, Base pairing, about Primer

소개

1.
<실 험 일> 2009년 10월 29일 (목) 2,3교시
<실험제목> Pipette 사용법 및 물의 질량측정

2. 신체의 세균학적 검사(PCR)

3. A,T,C,G의 Base Pairing

목차

<실 험 일

<실험제목

1. Discussion

① 실험에서 측정된 100㎕의 물 무게는 어떻게 되나요?

② 무게 측정이 정확합니까? 그 이유는 무엇인가요?

③ 어느 Micropipette이 더 정확합니까? 왜 그렇게 생각합니까?

④ 오늘 알게 된 것으로 Pipette을 사용하는 다음 실험에 어떻게 응용하겠습니까?

2. 신체의 세균학적 검사(PCR)

3. A,T,C,G의 Base Pairing

4. Primer?

본문내용

1. Discussion
① 실험에서 측정된 100㎕의 물 무게는 어떻게 되나요?
다른 실험값은 차이가 있었으나, first experiment의 1번 튜브에서의 0.1g , 8번 tube에서의 0.0999g, second experiment의 8번 tube에서 0.1g의 비교적 정확한 값을 얻어낼 수 있었다.
② 무게 측정이 정확합니까? 그 이유는 무엇인가요?
대체적으로 봤을 때 정확하지 못했다. 일단 저울의 이유로는, 저울이 민감해서 공기가 차단되긴 했지만, 부는 공기의 영향이 조금은 있을 수도 있고, 올려진 각도가 다르다거나, 위치가 정 가운데가 아니었을 때의 무게 차이를 고려해야 할 것이다. 그리고 pipette을 쓸 때 first stop 까지 정확히 눌러야 하는데, 살짝 덜 누르거나 더 눌렀을 수 도 있다. 아니면 빨아들일 때 너무 빠르게 빨아들여서 정확한 양이 들어가지 못했을 수 도 있다. 우리조의 실험의 데이터를 보면 대부분 양이 모자란 것을 볼 수 있는데, 이것은 실험자가 완전히 first stop을 누르지 못하고 살짝 덜 누른 것 같다. 아니면 실험실의 온도가 4℃가 아니기 때문에, 물의 밀도와 부피가 1g/ml가 아니었을 것이다. 때문에 부피가 좀 달랐을 수도 있겠다.



3. A,T,C,G의 Base Pairing
(Adenine-Thymine , Guanine-Cytosine)
DNA는 아데닌(adenine, A), 사이토신(cytosine, C), 구아닌(guanine, G), 티민(thymine, T)의 염기로 이루어져 있다. 이러한 염기가 일렬로 연결되어 긴 가닥을 형성하는데 이를 Polynucleotide라 한다. DNA는 이러한 Polynucleotide 두 가닥이 서로 사슬처럼 결합해 나선을 이루는 구조로 되어 있다. DNA가 이중나선구조를 형성할 때 두 개의 폴리뉴클레오티드에 있는 염기들은 무작위적으로 결합하지 않고, 아데닌(A)은 다른 가닥의 티민(T)과, 구아닌(G)은 다른 가닥의 사이토신(C)과 각각 수소결합으로 결합한다. 이 상보적인 결합으로 인해서, 염기쌍은 가장 적합한 배열을 이루고 이중나선의 내부에 위치하게 된다.
4. Primer?
PCR에서 쓰이는 Primer는 작은 주형의 DNA이다. 보통 20-35 사이의 뉴클레오 타이드로 구성되어 있다. PCR로 증폭하고자 하는 DNA부분에 맞는 Primer를 만들어 PCR을 행하면 원하는 부분이 증폭되는데 바로 이건 DNA 폴리머라아제 (DNA Polymerase)의 특성 때문이다.
DNA Polymerase는 어떤 조그만 프레그먼트가 없으면 증폭하지 못하는 성질이 있다. 생체에서는 작은 RNA primer를 만들어 주면 이것을 인지해서 증폭을 하게 되는데 PCR은 생체가 아니라 시험관에서 하는 것이기 때문에 작은 디엔에이 조각을 넣어주게 된다. 이것이 annealing온도에서 원하는 부분과 결합을

참고자료

· 없음