(About) Ligase, Restrict Enzyme, 전기영동

소개

생물학실험 중간 대체 레포트 리가아제, 제한효소, 전기영동

목차

1. Ligase(리가아제)
2. 제한효소
- XbaⅠ, PstⅠ
3. DNA전기영동

본문내용

1. Ligase(리가아제)
합성효소(synthetase)라고도 함.
화학 에너지의 보존반응을 촉매하고 에너지가 요구되는 합성과정과 에너지를 생산하는 분해반응 간의 짝지은 반응을 제공하는 50여 가지 효소들 가운데 하나.

리가아제는 에너지가 풍부한 인산 에스터결합을 끊어서(많은 경우 아데노신3인산에서 아데노신2인산으로의 동시전환에 의해 이루어짐) 생기는 에너지를 이용해 두 분자의 결합을 촉매한다. 아미노산과 운반 RNA(tRNA) 간의 탄소-산소 결합을 촉매하는 효소는 아미노산-RNA 리가아제라 한다. 탄소-질소 결합(C-N)은 아미드 합성효소나 펩티드 합성효소와 같은 효소의 작용으로 이루어진다.

플라스미드를 이용한 유전자 재조합 과정에서 리가아제는 외래DNA를 연결시키는 역할을 담당한다. 제한효소를 이용하여 잘라진 플라스미드에 주입하고자 하는 유전자를 절단한 후 리가아제를 이용하여 연결한다. 리가아제는 당-인산 골격을 공유결합으로 견결시킴으로서 외래 DNA가 완전하게 플라스미드의 일부가 될 수 있도록 하여 재조합 플라스미드를 제작한다.

유전공학에서 재조합 DNA(디옥시리보핵산)를 만들기 위해서 사용하는 특수한 효소이며 제한이란, 이질(異質)의 숙주(宿主) 중에서 증식한 DNA의 침입을 받았을 때 그 DNA와 자기의 DNA를 식별하고 분해해 버리는 현상을 말한다, 그리고 그런 작용을 하는 효소를 제한효소라고 한다.

제한효소는 그 특성(절단양식이나 활성발현인자 등)에 의해 Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ형의 3군(群)으로 대별된다. Ⅰ형 효소는 활성발현에 APT, S-아데노실 메티오닌 및 마그네슘이온(Mg2+)을 필요로 하고, DNA 속의 인식염기배열로부터 떨어진 부위를 절단하는데 그 위치는 일정하지 않아 유전공학 적으로 사용이 잘 되지 않는다. Ⅱ형 효소는 유전공학에서 널리 사용되는 것으로 활성발현에 마그네슘이온을 필요로 하여 DNA분자의 특정한 염기배열을 인식하고 그 부위 또는 인식염기배열로부터 일정 염기 떨어진 인접부위를 정확하게 절단 하는 것이 가장 큰 특징이다.

참고자료

· 없음