면역조직화학염색법에서 포르말린 고정의 특성

소개

의학, 자연과학을 전공한 학생들에게 유용한 자료입니다.

목차

1. 시간, 온도, pH 의존도
2. 항원성에 대한 고정의 영향
3. 포르말린 고정액의 장점과 단점
4. 포르말린 대체제

본문내용

1. 시간, 온도, pH 의존도
여러 연구에 의하면 포르말린 고정은 느린 과정으로써 통상적인 조직 블록에 대해 수 시간이 걸리는데, 이러한 이유로 이를 시계 반응이라고 부른다. 단백질-포름알데히드 반응의 느린 과정은 다음과 같은 여러조건에서 비롯된다.
1) 용액 내 포름알데히드는 쉽게 수화되어 메틸렌글리콜을 형성한다. 교차결합의 형성은 메틸렌글리콜이 포름알데히드로 재전환되는 것에 따르는데 그 이유는 고정의 1차 공유 화학반응은 유리 포름알데히드의 존재에 의존하기 때문이다.
2) 완전한 포르말린 고정은 2차적인 응축반응이 일어나야 하는데, 이는 가변적이고 복잡하며 시간과 pH 그리고 온도에 의존적인 반응이다.
3) 조직블록, 조직의 밀도(투과성), 그리고 포르말린 용액의 침투 속도 등에서 단순하지만 중요한 물리적인 한계가 있으므로 이들 모두는 가변적이다.
흰쥐 신장의 냉동절편을 고정하는 경우에 포름알데히드에 의한 시계반응을 조사한 폭스 등에 의하면 조직절편에 대한 포름알데히드의 결합은 시간과 함께 증가하여 최대(평형상태)에 도달하였는데, 평형에 도달하는데 걸리는 시간은 낮은 온도(25도에서 24시간) 보다 높은 온도에서 더 짧다(37도에서 18시간). 이러한 결론과 또한 물리적인 한계로 인해 포르말린에 더 균일하게 고정되기 위해서는 조직이 얇을수록 좋다. 또한 포르말린을 사용한 고정에 있어 통상적인 가열방법 혹은 마이크로파 가열방법을 사용하여 높은 온도에서 행하는 빠른 고정 프로토콜이 개발되었다.

참고자료

· 없음