[분자생물학]Cloning vector for E. coli

소개

매우 많은 cloning vector들은 숙주 생물체로서 E. coli를 이용하기 위해 존재한다는 의미를 가지고 작성한 레포트입니다.

목차

1. Cloning vectors based on E. coli plasmids
(1) The nomenclature of plasmid cloning vectors
(2) The useful properties of pBR322
(3) The pedigree of pBR322
(4) Other typical E. coli plasmid cloning vectors
2. Cloning Vectors Based on M13 Bacteriophage
(1) Development of the cloning vector M13mp2
(2) Hybrid plasmid - M13 vectors
3. Cloning Vectors Based on λ Bacteriophage
(1) Segments of the λ genome can be deleted without imparing viability
(2) Natural selection can be used to isolate modified λ that lack certain restriction sites
(3) Insertion and replacement vectors
(4) Cloning experiments with λ insertion or replacement vectors
(5) Very large DNA fragments can be cloned using a cosmid
4. λ and other high capacity vectors enable genomic libraries to be constructed
5. Vectors for other bacteria
6. 참고문헌

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본문내용

대장균을 위한 다양한 Cloning Vectors들이 있다. 본론의 내용은 매우 많은 cloning vector들이 숙주 생물체로서 E. coli를 이용하여 형질 발현하기 위해 존재하는 것을 알 수 있다..

1. Cloning vectors based on E. coli plasmids
Gene cloning에서 가장 널리 사용되는 가장 단순한 cloning vector들은 작은 bacterial plasmid에 기초하고 있다. 매우 많은 plasmid vector들이 상업적으로 공급되고 있으며 대부분의 평범한 gene cloning 실험은 이러한 plasmid vector 들 중 하나 이상을 사용한다.
&amp;#8226; 가장 간단한 클로닝 벡터 그리고 유전자 클로닝에서 가장 많이 쓰이는 클로닝 벡터는 플라스미드임
&amp;#8226; 구입가능
&amp;#8226; 높은 형질전환 효율, 형질전환체와 재조합 분자들에 대한 편리한 선별표식자, 비교적 큰 DNA 단편(약8Kbp) 클론 가능, 정제의 용이함

(2) The useful properties of pBR322
1) pBR322의 첫 번째 유용한 특징은 크기이다. (4363bp)
이는 벡터 그 자체가 쉽게 정제될 수 있다는 것뿐만 아니라 재조합 DNA 분자의 크기가 6Kb일지라도 재조합 분자는 여전히 다룰만한 크기가 될 것이다.
2) 두 번째 특징은 항생제 저항 유전자 두 세트를 지니고 있다는 것이다.
Ampicillin, 혹은 tetracycline 저항은 플라스미드를 포함하는 세포에 대해 선별표식자로써 사용될 수 있으며 각 표식자 유전자는 클로닝 실험에 사용될 수 있는 독특한 제한부위를(restriction site) 가지고 있다.
PstⅠ, PvuⅠ 혹은 ScaⅠ으로 절단된 pBR322속으로 새로운 DNA를 삽입하는 것은 ampR 유전자를 비활성화 시키며 8개의 제한효소 중 어느 하나에 삽입하는 것은 tetracycline 저항성을 비활성화 시킨다. 삽입 비활성화에 사용될 수 있는 제한 부위의 대단한 다양성은 pBR322가 여러 가지 종류의 sticky 말단을 가진 DNA 단편을 클론시키는데 사용될 수 있다는 것을 의미한다.

참고자료

· Gene Cloning & DNA Analysis An Introduction 5th Ed. by T A Brown by alive p.107~130『Chapter 6』
· 유전자 클로닝과 DNA 분석 입문서 번역