제한효소에 의한 DNA 절단

소개

좋은 성적 받은 레포트 입닏.

목차

1. Subject
2. Object
3. Introduction
4. Method
5. Result
6. Discussion

본문내용

1. Subject : 제한효소에 의한 DNA의 절단

2. Object :
시험관 내에서 유전자 조작을 행할 때 쓰는 가장 기본적인 도구인 제한효소와 제한효소의 제한 기작을 알아보고, 전기영동을 통해 제한효소가 잘 반응 하였나 알아본다.

3. Introduction
제한효소
1> RE의 기능
제한효소가 인식하는 부위는 회문(palindrome)이라는 특수한 모양을 가진다. 즉 양 사슬의 5`에서 3`방향으로 똑같은 염기서열을 가진다는 뜻이다. 특정 염기서열은 인식자리를 나타낸다. 예를 들어 효소 EcoRI는 DNA 이중나선에서 GAATTC라는 염기서열 만날 때에만 DNA를 절단하여 5`-overhang cohesive end를 형성한다.
5`--GAATTC--3` → 5`--G/AATTC--3`
3`--CTTAAG--5` → 3`--CTTAA/G--5`
(/부분이 절단 되는 부분)
위와 같이 지그재그 모양으로 절단되는 것을 sticky end라고 한다. 반면 중앙부를 일자로 자르는 제한효소도 존재하는데, 이때는 blent end라고 부른다. 제한 효소마다 인식하는 염기서열의 개수도 차이가 있다. 보통 4개, 6개, 8개, 12개의 제한효소를 인식한다. 이 인식서열은 일반적인 원핵생물 게놈에서 평균 4,000개마다 한번, 혹은 4개 원핵생물 유전자당 1번 나타난다. 이렇게 수백 종류의 다양한 미생물로부터 분리된 제한효소는 각기 다른 인식서열을 가지고 있고, 시험관에서 DNA 시료를 원하는 절편으로 자르는 데 사용할 수 있다. 세포에서 제한효소를 생성할 때 자신의 DNA를 절단하는 것을 막기 위해 메틸화효소를 활성화 시켜 자신의 DNA가 복제될 때 제한자리에 있는 특정 염기에 메틸기를 첨가한다. 제한효소는 이 메틸기를 인식하고 그 부분을 절단하지 않는다. 이것을 메틸화(Methylation)이라 한다.

참고자료

· 없음