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immobilized peroxidase의 assay

immobilized peroxidase의 assay
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최초등록일 2010.04.14 최종저작일 2010.04
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immobilized peroxidase의 assay
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    소개

    immobilized peroxidase의 assay

    목차

    1. 결과보고서 내용
    2. immobilized peroxidase의 assay
    3. immobilized peroxidase의 assay

    본문내용

    1. 결과보고서 내용
    Data report
    Analysis of results(text book): 그래프 그려서 fitting하기(분산된 정도 구하기)
    Discussion: immobile enz.를 어디에 사용하는가. activity 감소가 왜 immobile이 큰가

    2. immobilized peroxidase의 assay
    1) calibration: 버퍼와 물을 넣고서 Abs= 0을 맞췄다.

    2) 엔자임 양에 따른 촉매 능력 측정
    ① gel을 0.05, 0.1, 0.2, 0.3g 씩 튜브에 넣는다.
    -여기부터는 튜브 별로 하나씩 했다.
    ② 2.5ml 의 aminoantipyrene-phenol soln.을 넣고 잘 섞는다.
    ③ 2.5ml의 H2O2를 넣고 시계를 3분으로 해놓는다.
    ④ 3분이 되면 주사기에 넣고 거른다(반응 stop과정이다)
    *주의 ③~④사이가 3분이다.
    ⑤ Abs at 510nm를 측정한다.

    3. immobilized peroxidase의 assay
    1) 시험관에 immo/60도, immo/25도, free/60도, free/25도 라고 적는다.
    - 효소를 각 튜브에 넣은 후 60도라고 적힌 것은 4분 동안 60도 waterbath에서 heatshock

    2) Free한 효소의 과정이다
    ① free/60도, free/25 시험관에 500ul의 peroxidase를 넣는다,
    ② 2.25ml의 aminoantipyrene-phenol soln.을 넣는다.
    ③ 2.25ml의 H2O2를 넣고 3분동안 반응시킨다.
    ④ 각각의 Abs at 510nm를 측정한다.

    참고자료

    · 없음
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