[분자생물학실험]C. elegans NGM Media & Preperation of Bacterial Food Source

소개

C. elegans NGM Media & Preperation of Bacterial Food Source

목차

1. 실험목적
2. 실험원리
3. 실험과정 및 재료
4.실험결과
5. 고찰

본문내용

1. 실험목적
*Caenorhabditis elegans를 알자
*C.elegans를 이용해 항비만 물질을 screening하자
*lin-44와 rnt-1을 이용한 double mutant를 PCR을 이용해 검증하자.

2. 실험원리
Caenorhabditis elegans

예쁜꼬마선충의 모습(좌)과 짝짓기(우)

우리나라 학명으로는 예쁜꼬마선충인 Caenorhabditis elegans는 흙에서 박테리아를 먹고사는 선충류로서 다리나 날개가 없고 눈이나 체절이 없으며 머리나 꼬리에 있는 감각기관을 통해서 주변의 온도와 촉감 및 냄새 등을 감지함으로써 외부 환경으로부터 오는 신호로 음식을 찾는 것을 도와주며 다른 개체들이 주변에 있다는 것을 알아차리게 해준다. 성체의 크기는 1 mm 정도이고 비교적 단순한 형태를 지닌 다세포 생물이다. 알에서 부화된 뒤 4단계의 탈피과정을 거쳐 선충이 되는데 약 3일이 소요되며 평균수명은 2-3주 정도이다. 이때 성장하기에 적당한 온도는 15-25℃이다.
 예쁜꼬마선충은 자웅동체와 웅체의 2가지 성별로 되어있다. 웅체는 생식세포 분열시 염색체 비 분리 현상에 의해 아주 작은 빈도로 존재한다. 성체가 되었을 때 웅체가 자웅동체보다 작고 가늘게 생겼다. 그리고 자웅동체는 대략 320개 정도의 정자를 만들고 1000개 이상의 난자를 생성한다. 따라서 자웅동체는 단독으로 자가수정에 의해서 320마리 정도의 자손을 만들 수 있고 웅체와의 교미를 통해 더 많은 자손을 만들 수 있다.
 예쁜꼬마선충은 해부학적으로나 유전학적으로 아주 단순한 생명체로 성체가 되었을 때, 자웅동체의 경우는 생식세포를 제외하면 전체 세포수가 959개에 불과하고 웅체의 경우는 1031개 정도이다. 그리고 예쁜꼬마선충은 6개의 염색체를 가지는데 5개가 체성 염색체이고 1개가 성염색체이며, 자웅동체는 XX, 웅체는 XO로 표기한다. 그러나 C. elagans genome 프로젝트 결과 예쁜꼬마선충은 9700만 쌍의 염기서열을 가지고 있고 1만 9천개 이상의 유전자를 가지고 있다 .이것은 효모 유전자에 비해 3배 정도로 많으며 사람의 유전자의 1/3-1/5정도이다. 그리고 각각의 유전자에는 평균 5개의 인트론(intron)이 있고 염색체의 GC%가 36%이며 autosome(상염색체)에서는 tandem repeat 구조와 invert repeat가 꽤 많이 존재한다.

참고자료

· 1.어 영, 장인호, 권장연, 김남식, 김명철, 박덕우, 윤갑준
· 임산부의 Group B Streptococci 보균자 검출을 위한 New Granada선택배지의 유용성에 대한 연구.
· 원주의대논문집 1996;9:7-15.
· 2.서정훈, 외 공저 (최신)미생물학/ 徐正塤 外 共著. 螢雪出版社,1998
· 3.미셸 모랑쥬 지음 ; 강광일 ; 이정희 ; 이병훈 [공]옮김. 분자생물학 : 실험과 사유의 역사, 몸과마음
· 4. Antibodies, Harlow, E &Lane, D., Cold Spring Harbor Laboratory, 1988