virus 진단법

소개

Diagnosis of Norovirus
이번 실험에서는 바이러스의 핵산을 분석하는 방법으로 stool에서 norovirus를 검출하였다. 먼저 장염의 원인이 되는 norovirus를 lysis시켜 single strand인 viral RNA를 추출하였다. 이 viral RNA는 reverse transcriptase를 이용하는 RT-PCR을 거쳐 complementary DNA를 합성하는데 사용되었다. 그 다음으로는 contamination을 최소화하여 double strand의 DNA를 얻기 위해 PCR을 두 번 반복하는 seminested PCR를 하였다. 얻어진 DNA를 gel electrophoresis해 본 결과 약 300 bp의 band가 뜬 것을 확인할 수 있었다. 약 300 bp는 실험에서 사용된 norovirus 핵산의 예측된 size이므로 norovirus를 알맞게 추출했음을 알 수 있었다.

목차

Abstract:
Introduction:
Materials & Methods:
Result:
Discussion:
Reference:

본문내용

이번 실험에서는 바이러스의 핵산을 분석하는 방법으로 stool에서 norovirus를 검출하였다. 먼저 장염의 원인이 되는 norovirus를 lysis시켜 single strand인 viral RNA를 추출하였다. 이 viral RNA는 reverse transcriptase를 이용하는 RT-PCR을 거쳐 complementary DNA를 합성하는데 사용되었다. 그 다음으로는 contamination을 최소화하여 double strand의 DNA를 얻기 위해 PCR을 두 번 반복하는 seminested PCR를 하였다. 얻어진 DNA를 gel electrophoresis해 본 결과 약 300 bp의 band가 뜬 것을 확인할 수 있었다. 약 300 bp는 실험에서 사용된 norovirus 핵산의 예측된 size이므로 norovirus를 알맞게 추출했음을 알 수 있었다.

Introduction:
바이러스는 크기가 너무나 작아 직접적인 관찰은 전자현미경으로만 가능하며 이 경우에도 상당한 양의 바이러스를 필요로 한다. 따라서 바이러스의 검출과 분석은 간접적인 방법에 많이 의존하는데 이는 크게 세 가지로 나눌 수 있다. 첫째는 적절한 배양 시스템을 이용하여 바이러스를 감염시키고 그 결과로서 나타나는 영향을 관찰하는 것이며, 둘째는 바이러스의 항원 단백질과 이에 대한 항체의 특이성을 이용하는 방법이며, 셋째로 바이러스의 핵산을 분석하는 방법을 들 수 있다.
핵산 분석 방법 중에서 중합효소연쇄반응법에서는 분석하고자 하는 바이러스와 같은 염기서열을 가진 올리고핵산을 프라이머로 이용한다. 바이러스 DNA와 상보성을 갖는 2개의 프라이머를 바이러스 DNA와 결합시키고 중합반응을 진행시키면 두 프라이머 사이에 위치한 DNA만 선택적으로 증폭할 수 있다. PCR에 의하면 초기에 검체에 존재하는 DNA가 연쇄 반응에 의하여 기하급수적으로 증폭되기 때문에 극미량의 바이러스 핵산도 검출할 수 있어 바이러스 진단을 획기적으로 개선시켰다. PCR도 상보적 결합과 마찬가지로 증폭하고자 하는 DNA와 프라이머 사이의 염기서열의 상보적 특성에 의존하므로 다른 핵산이 섞여 있다 하더라도 원하는 DNA만을 선택적으로 증폭할 수 있는 것이 큰 장점이다. RNA를 갖는 바이러스의 경우 역전사효소를 이용하여 DNA로 변환한 후에 중합반응(RT-PCR)을 행함으로써 같

참고자료

· - 대한바이러스학회, 바이러스학, 2004, 정문각, pp.55~66
· - 강병철, 세포학, 2000, 한우리, pp.105~114
· - http://en.wikipedia.org/
· - http://images.google.com/