생화학 실험 2 후반부 : 3주차 : SDS-PAGE & Bradford Assay

소개

연세대학교 생화학 실험 2 후반부 3주차 실험에 대한 리포트입니다.

목차

1. 실험 제목
2. 실험일자
3. 제출자 및 공동실험자:
4. 목적
5. 원리
6. 시약 및 기자재:
7. 방법:
8. 결과:
9. 고찰
10. 참고문헌
11. 숙제(Further study):

본문내용

(1) SDS-PAGE
① SDS-PAGE의 원리와 사용 목적
SDS-PAGE는 charge를 띠고 있는 molecule을 전기장 내에서 이동시켜 mass와 shape 등의 정보를 얻을 수 있는 유용한 실험 기법 중 하나이다.(실제로 SDS는 protein 등의 구조를 파괴시키기 때문에 shape보다는 mass를 얻기에 좋은 실험 기법이다.) 이때 이용될 수 있는 식으로는 v=Eq/f 가 있는데 여기서 E는 전기장의 세기로 volts/cm의 단위를 갖고 q는 molecule의 net charge이고 f는 frictional coefficient이다. SDS-PAGE의 목적에 대해 언급하자면 위에서도 언급했듯이 shape과 mass 등의 정보를 얻는 것이 SDS-PAGE를 실시하는 목적이라 할 수 있는데 shape에 대한 정보를 얻기에는 그 제한 요인이 너무 많아 자세한 정보를 얻기 힘들고 대신 적절한 조건만 맞춰준다면 size information을 알 수 있다. 즉, 정리해보면 SDS-PAGE는 molecule의 size information을 얻는데 유용한 실험 기법이라 하겠다.
② SDS-PAGE의 구성
SDS-PAGE의 구성에 대해 알기 위해서는 먼저 Polyacrylamide gels에 대해 알아야 한다. polyacrylamide는 protein separations 하는데 이용될 수 있고 acrylamide와 N,N`-methylene -bis-acrylamide의 free radical 중합으로 얻어질 수 있다. 이러한 중합은 APS와 TEMED 각각의 촉매작용에 의해 시작될 수 있다. APS와 TEMED의 촉매 작용에 의해 Acrylamide가 Polyacrylamide가 되고 이 Polyacrylamide를 bisacrylamide로 연결시켜 주면 우리가 원하는 gel이 만들어지는 것이다. Polyacrylamide gels은 작은 size의 protein부터 중간 size의 protein까지 잘 분리할 수

참고자료

· ①생화학 실험(Ⅱ) 2008년도 1학기 후반부 Basic Tools for Molecular
· Cloning 연세대학교 생화학과
· ②Stryer Biochemistry Sixth Edition Freeman
· ③Naver and other Internet site
· ④위키피디아(http://en.wikipedia.org/wiki/Bovine_serum_albumin)