Diagnosis of Norovirus

소개

Diagnosis of Norovirus에 관한 실험보고서

목차

Abstract
Introduction
Materials & Methods
Result
Discussion
References

본문내용

Abstract
이번 실험에서는 장염을 일으키는 norovirus를 진단하는 실험이다. 우선, virus로부터 RNA를 추출하여 purification시킨 후, reverse transcription으로 cDNA를 얻고 이것을 PCR을 통해 증폭시켜 gel electrophoresis를 통해 virus의 존재 유무를 알아보고 size를 확인해보았다. 실험에서 사용한 시료는 실제로 size가 389bp이므로 PCR 후에 gel electrophoresis를 통해 이 부근에서 band가 확인될 것을 예상했다. 예상대로 ladder 0.4kb 쯤에서 band를 관찰할 수 있었다.

Introduction
< Figure 1. PCR 과정 >
PCR(polymerase chain reaction)은 DNA를 복제 및 증폭시키는 분자생물학적인 기술로, 대장균이나 효모 같은 생물을 쓰지 않는 방법이다. 이 기술은 사람의 genome과 같은 매우 복잡하고 양이 지극히 미량인 DNA 용액에서 연구자가 원하는 특정한 DNA fragment만을 선택적으로 증폭시킬 수 있다. 또한, 증폭하는 데에 2시간 정도의 비교적 짧은 시간이 소요되며 실험 과정이 단순하고, 전자동 기계로 증폭할 수 있기 때문에 PCR과 거기서 파생된 여러 가지 기술은 분자 생물학, 의료, 범죄 수사, 생물의 분류 등 DNA를 취급하는 작업 전반에서 지극히 중요한 역할을 담당하고 있다. 앞서 말했듯이 PCR은 원하는 부위의 유전인자를 매우 많이 증폭할 수 있는 기술인데, 이는 1984년에 Kary Mullis가 특정 DNA sequence를 증폭하기 위한 방법으로 고안했다. 이듬해인 1985년에 elongation enzyme으로 Klenow polymerase를 사용하는 PCR이 처음 공식적으로 발표되었다. Klenow polymerase는 열에 약했기 때문에 매 cycle을 수행할 때마다 새로운 enzyme을 넣어 주어야 했고 생성물의 최대 길이는 400bp에 불과했다. 1988년에 DNA polymerase로 Thermus aquaticus에서 추출한 Taq polymerase를 사용한 논문이 발행되었다. 열에 강한 이 polymerase는 PCR의 효율을 월등히 끌어올렸다.
PCR에는 세 단계가 있고 30~40cycle 정도 반

참고자료

· 강호정 외 10명 / 생명과학과 생명공학 / 2007 / 라이프 사이언스 / pp.312-316
· Nicholas H. Acheson / Fundamental of Molecular Virology / 2007 / pp.273-275, p338