P1 tranduction UV selection & Streptomyces culture

소개

UV selection을 통해서 P1 transduction의 성공 여부를 확인하며, Streptomyces Coelicolor를 키워보고 생활사를 관찰해 봅시다.

목차

1. Subject: UV selection & Streptomyces culture
2. Object: UV selection을 통해서 P1 transduction의 성공 여부를 확인하며, Streptomyces Coelicolor을 키워봅시다.
3. Introduction
4. Materials
Clean bench, Ultraviolet Radiation Machine, loop, plate, EGTA, alcohol lamp, Streptomyces Coelicolor
5. Methods
6. Results
7. Discussion
8. References

본문내용

3. Introduction
(1) 저번 실험인 UV selection에서 제대로 된 결과가 나오지 않은 이유들
첫 번째로는 EGTA를 처리해 주지 않았다는 점입니다. 만약 EGTA를 넣어주지 않는다면, Ca2+와 같은 이온들의 숫자가 많아지게 됩니다. 그러므로 우리가 넣어준 recombination된 cell들이 Lytic cycle로 넘어가게 됩니다. 그러므로 이번 실험에서는 EGTA를 넣어줌으로써 Ca2+를 제거해주고, 결과적으로 Lysogenic cycle 단계를 밟음으로써, cell들이 죽지 않고 잘 자라게 해 보도록 합니다.
두 번째로는 Streaking을 잘못해서 입니다. Streaking을 너무 두껍게 하게 되면, cell들 간에 층이 생겨 버리게 됩니다. 만약 이렇게 층이 생기면, UV 처리할 경우에 위에 층에만 UV의 영향이 있겠으며, 아래 층의 cell들은 영향을 받지 않아서 결과를 얻어낼 수 없게 됩니다.
(2) 우리가 배양할 Streptomycin은 무엇인가?
스트렙토마이신(Streptomycin)은 방선균(放線菌)의 일종인 스트렙토미세스 그리세우(Streptomyces griseus)의 대사물에서 발견된 항생물질입니다. 최초의 항결핵성 항생물질로서, 미국의 뉴저지주(州)의 토양에서 얻은 방선균의 배양에 의하여 추출되었는데, 제품으로는 보통 염산염 •황산염 등이 있다. 1943년 셀먼 왁스먼이 발견하고 1945년 결핵에 효력이 있음이 인정되어 항생물질 발전의 단서가 되었습니다.
많은 그람음성균(페니실린이나 술파제는 작용하기 어렵습니다.)을 비롯하여 광범위한 병원미생물에 작용합니다. 그러나 이명(耳鳴:귀울음) •난청의 부작용이 있으므로 복용 중에는 청력의 이상에 주의해야 합니다. 독성이 약한 수소 첨가물인 디히드로스트렙토마이신과 디히드로데옥시스트렙토마이신도 있으며 보통 이소니아지드 •파라아미노살리실산(파스:PAS)과 함께 쓰입니다. 이와 같이 주로 의약분야에서 항생물질로 사용해 왔으나, 식물의 세균성 병해 방제(防除)에 효과가 있음이 밝혀져 농약으로도 사용하기 시작하였습니다.

참고자료

· http://blog.naver.com/braveattack?Redirect=Log&logNo=10046418571
· http://en.wikipedia.org/wiki/Geosmin
· http://openwetware.org/wiki/Streptomyces:Other_Bits/An_Introduction_to_Streptomyces