냉동보관 전 제대혈 세포의 생존율 평가 (Assessment of Cell Viability in Umbilical Cord Blood before Cryopreservation)

서지정보

· 발행기관 : 대한수혈학회
· 수록지 정보 : 대한수혈학회지 / 21권 / 2호 / 140 ~ 147페이지
· 저자명 : 이대영, 허지영, 강명서

초록

배경: 제대혈의 생존율 측정은 제대혈 제제의질관리에 있어 중요한 지표가 된다. 세포생존율측정법은 trypan blue 염색법이 간편하여 가장 흔히 사용되는 방법이다. 최근 소개된 7-aminoactinomycin (7-AAD)을 이용한 유세포분석법은trypan blue에 비해 세포손상을 예민하게 반영하고 총 유핵세포, 단핵구, CD34 양성세포군에서각각 생존율의 특정이 가능한 장점이 있다. 저자들은 trypan blue와 7-AAD 염색법을 이용하여 측정한 생존율을 비교하고, 총 유핵세포와 각 세포군별로 측정한 생존율을 비교하고자 하였다.
방법: 2010년 2월에서 7월 동안 수집된 제대혈102단위를 대상으로 각각 trypan blue 염색법과7-AAD를 이용한 유세포분석법으로 총 유핵세포의 생존율을 측정하였다. 또한 7-AAD 염색법으로는 총 유핵세포뿐 아니라 단핵구, CD34 양성세포에 대해 생존율을 각각 측정하였다.
결과: Trypan blue와 7-AAD로 측정한 총 유핵세포의 생존율은 각각 90.1±5.7%와 68.4±8.0%였다. 7-AAD로 측정한 단핵구 및 CD34 양성세포의생존율은 각각 91.8±4.3%, 93.4±5.1%였다.
결론: 총 유핵세포의 생존율은 7-AAD 방법이trypan blue 염색법으로 측정한 것보다 유의하게낮았다. 7-AAD법으로 측정한 경우, 단핵구나CD34 양성세포의 생존율은 총 유핵세포의 생존율보다 유의하게 높았다. 제대혈이식 후의 생착과 예후에 중요한 것은 단핵구나 CD34 양성세포의 생존율이므로 향후 7-AAD법으로 이들의 생존율을 같이 측정한다면 제대혈제제의 품질관리에도움이 될 것으로 사료된다.

영어초록

Background: The viability of cord blood is an important measure of product quality. Trypan blue (TB) stain is the most commonly and conveniently used method to measure the viability of the cord blood. Recently,cytometric analysis using 7-Aminoactinomycin D (7-AAD) was introduced. Staining with 7-AAD is more sensitive in detecting cellular damage than staining with TB. In addition to this, 7-AAD allows specific measurement of the viability of total nucleated cells (TNC), mononuclear cells (MNC) and CD34+ cells. In this study, we compared the viability of TNC between the TB and 7-AAD method, as well as analyzing the viability of each cell population.
Methods: From February to July 2010, 102 cord blood units were collected and assessed for the viability of TNC by the TB and 7-AAD methods. The viability of mononuclear cells (MNC) and CD34+ cells was assessed by 7-AAD method.
Results: The TB and 7-AAD methods were used to assess the viability of TNC, which was 90.1±5.7% and 68.4±8.0%, respectively. The viability of MNC and CD34+ cells measured by the 7-AAD method was 91.8±4.3% and 93.4±5.1%, respectively.
Conclusion: The TNC viability of 7-AAD method was significantly lower than that of TB method. In 7-AAD method, the viabilities of MNC and CD34+ cells were significantly higher than that of TNC. As those are important prognostic factors and measures for successful engraftment after the transplantation, the measurement of the viabilities of MNC and CD34+ cells by 7-AAD method would be helpful to the quality control of the cord blood product. (Korean J Blood Transfus 2010;21:140-147)

참고자료

· 없음