각막윤부 줄기세포의 줄기세포성 유지 및 증식에 대한 Wnt 단백질의 효과 (The Effects of Wnt Protein on Proliferation and Stemness Maintenance of Corneal Limbal Stem Cells (CLSCs))

서지정보

· 발행기관 : 대한안과학회
· 수록지 정보 : 대한안과학회지 / 50권 / 4호 / 588 ~ 593페이지
· 저자명 : 진현진, 주천기

초록

목적: 각막윤부 줄기세포의 증식 및 줄기 세포성 유지에 대한 Wnt 단백질들의 효과에 대해 알아보고자 하였다.
대상과 방법: Wnt단백질의 발현은 western blot 분석을 이용하여 확인하였다. 각 Wnt에 의한 증식률은 콜로니 형성률로 확인하였고,
Wnt에 의한 β-catenin활성은 면역형광 염색법으로 확인하였다. 각 Wnt에 의한 줄기세포성 유지 및 분화에 대한 효과는 p63과
connexin43에 대한 RT-PCR 이용하여 확인하였다.
결과: Wnt별 각막 윤부 줄기세포에 미치는 영향은 서로 상이하였으며, Wnt2와 Wnt4가 발현되는 배양액에서 성장한 각막윤부 줄기세
포가 대조군에 비해 유의적으로 높은 증식률을 보였다. Wnt2와 Wnt4에 영향을 받은 각막윤부 줄기세포에서 β-catenin이 핵에서 확인
되었다. p63은 Wnt2, Wnt4, Wnt5a, Wnt5b가 발현된 배양액에서 성장한 각막윤부 줄기세포에서 높게 발현되었다. 반면, Connexin43은
Wnt5a, Wnt5b, Wnt7b에서 높게 발현되는 것을 확인하였다.
결론: Wnt subtype 중 Wnt2와 Wnt4는 각막윤부 줄기세포의 증식과 줄기세포성 유지에 효과적일 것이라 판단된다.

영어초록

Purpose: To evaluate the effects of the Wnt protein on proliferation and stemness maintenance of cultured corneal limbal stem
cells.
Methods: We examined the expression of Wnt proteins by Western blot analysis. We then evaluated the effects of Wnt on cell
proliferation by colony forming efficiency. β-catenin activation using Wnt proteins was examined by immunocytochemistry. We
also examined the effects of Wnt on proliferation and stemness maintenance by reverse transcriptase polymerase chain reaction
of p63 and connexin43.
Results: Wnt has a different effect on corneal epithelial stem cells. Colony forming efficiency was also significantly higher in
treated Wnt2 and Wnt4 cells compared with controls. The Wnt2 and Wnt4 treated cells showed nuclear accumulation of β
-catenin. In addition, the limbal stem cell marker p63 was strongly expressed in Wnt2, Wnt4 Wnt5a, and Wnt5b. Connexin43
mRNA was also strongly expressed in Wnt5a, Wnt5b and Wnt7b cells.
Conclusions: We suggest that Wnt2 and Wnt4 could lead to more effective proliferation and stemness maintenance for human
corneal epithelial stem cells.

참고자료

· 없음