돼지 난자용 유리화동결 기구의 고안 및 생존율 분석 (Development of vitrification device and analysis of survival rate)

서지정보

· 발행기관 : 한국산학기술학회
· 수록지 정보 : 한국산학기술학회논문지 / 23권 / 7호 / 353 ~ 358페이지
· 저자명 : 황인설, 박미령

초록

본 연구에서는 돼지 난자용 유리화동결 기구를 고안하고 그 생존율을 분석하고자 하였다. 일반적인 실험실에 구비되어 있는 연구 기자재인 nylon mesh와 inoculation loop를 활용하여 유리화동결용 기구를 제작하였고, 체외성숙 돼지 난자를 이용하여 유리화동결 과정을 진행하였다. 그 결과, 40과 50㎛의 nylon mesh를 사용하여 유리화동결 과정을 진행하였을 때 각각 71.7과 75.5%의 생존율을 보였으며, 이미 상용화된 동결기구인 Cryotop의 생존율 71.7%와 유사한 결과를 획득하였다. 하지만, 30, 60, 70㎛의 nylon mesh를 사용한 경우, 각각 58.3, 65.0, 56.7%의 생존율로 Cryotop과 비교하여 유의하게 (p<0.05) 감소되는 결과를 보였으며, 유리화동결과정 중 발생하는 동결상해로 인한 것으로 사료되었다. 또한 본 연구에서 제작된 nylon mesh 동결기구를 사용할 경우, 유리화동결과정 중 동결액 부피의 최소화를 용이하게 할 수 있었다. 결론적으로, 본 연구에서 고안된 간이 동결기구를 사용할 시 기존의 상용 기구인 Cryotop과 비교하여 유리화동결의 과정이 간소화됨은 물론 다량의 난자를 일시에 처리할 수 있었다. 특히 40과 50㎛의 nylon mesh 동결기구를 사용할 경우 높은 생존율을 확보할 수 있고, 이를 활용하여 다량의 난자를 처리해야하는 가축이나 동물의 유전자원보존에 있어 활용성이 매우 높을 것으로 사료된다.

영어초록

This study endeavored to develop a vitrification device and examine the survival rates of pig oocytes following vitrification and warming. General lab equipment, such as nylon mesh and inoculation loop, were used to develop the vitrification device. The survival rate was examined using in vitro matured pig oocytes. Our results reveal that 40 and 50 μm nylon mesh showed significantly (P<0.05) higher survival rates (71.7 and 75.5%, respectively) compared to other mesh sizes of 30, 60, and 70 μm (58.3, 65.0, and 56.7%, respectively), and were comparable to survival obtained with Cryotop (71.7%). Cryoinjuries by dislocation of oocytes (with 60 and 70 μm mesh) and higher volume of vitrification solution (30 μm) resulted in reduced survival rates. However, the oocytes could be safely located and excessive vitrification solution could be removed easily in the 40 and 50 μm groups. In conclusion, we confirm that 40 and 50 μm of nylon mesh is very useful for preserving a high amount of pig oocytes with survival rates comparable to a commercialized vitrification device.

참고자료

· 없음