Monocyte Chemoattractant Protein-1 (MCP-1)이 인간 복막중피세포의 상피-중간엽 이행 (epithelial to mesenchymal transition)에 미치는 영향 (The Effect of Monocyte Chemoattractant Protein-1 (MCP-1) on Epithelial-Mesenchymal Transition in Human Peritoneal Mesothelial Cells)

서지정보

· 발행기관 : 대한신장학회
· 수록지 정보 : Kidney Research and Clinical Practice / 27권 / 5호 / 545 ~ 552페이지
· 저자명 : 이금희, 강신욱, 이정민, 유정화, 유민아, 김승정, 강덕희, 최규복, 윤견일, 유태현, 류동열

초록

목적:본 연구에서는 배양 인간 복막중피세포에서 MCP-1의 세포수용체인 C-C chemokine receptor 2 (CCR2)가 존재하는지를 확인하고, 이를 통하여 MCP-1이 복막중피세포의 상피-중간엽 이행 (epithelial-mesenchymal transition, 이하 EMT)과 fibronectin 합성에 미치는 직접적인 영향을 알아보고자 하였다.
방법:복막중피세포를 정상 포도당 (5.6 mM, LG)군, 고포도당 (100 mM, HG)군, LG+94.4 mM mannitol군, LG+ 10 ng/mL recombinant human MCP-1 (LG+MCP-1)군, LG군과 HG군에 CCR2의 억제제인 1.0 µM RS102895를 첨가한 군의 6군으로 나누어 4일 동안 배양한 후 세포로부터 mRNA와 단백을 추출하였다. 세포배양액으로 분비된 MCP-1은 ELISA법으로 측정하였고, fibronectin, E-cadherin, α-smooth muscle actin (α-SMA) 및 CCR2 단백 발현을 Western blot으로 분석하였다.
결과:MCP-1은 HG군의 세포배양액에서 LG군에 비하여 의미있게 증가되어 있었다 (p<0.05). CCR2 단백은 발현이 확인되었으나, LG군과 HG군 사이에 의미있는 차이는 없었다. α-SMA 단백 발현은 LG군에 비하여 HG군과 LG+ MCP-1군에서 유의하게 증가되었으며, E-cadherin 단백 발현은 LG군에 비하여 HG군과 LG+MCP-1군에서 의의있게 저하되어 있었다 (p<0.05). 또한, fibronectin mRNA 및 단백 발현은 LG군에 비하여 HG군과 LG+MCP-1군에서 유의하게 증가되었다 (p<0.05). 고포도당에 의한 이러한 변화는 RS102895 전처치에 의하여 유의하게 억제되었다.
결론:복막중피세포에는 MCP-1에 반응하는 CCR2 수용체가 존재하며, 고포도당 자극에 의하여 MCP-1 분비가 증가하고, MCP-1은 CCR2 수용체를 통하여 직접적으로 복막중피세포의 fibronectin 합성 증가와 EMT 유도 효과를 나타내는 것으로 사료된다.

영어초록

Purpose : This study was undertaken to elucidate whether CC chemokine receptor 2 (CCR2) exists in human peritoneal mesothelial cells (HPMCs) and whether monocyte chemoattractant protein-1 (MCP-1) has direct effects on epithelial to mesenchymal transition (EMT) and fibronectin expression in HPMCs.
Methods : HPMCs were isolated from a piece of human omentum and were incubated with M199 media containing 5.6 mM glucose (LG), 5.6 mM glucose+94.4 mM mannitol (LG+M), LG+10 ng/mL recombinant human MCP-1 (LG+MCP-1), or 100 mM glucose (HG) with or without a specific inhibitor of CCR2, 1.0 µM RS102895, for 4 days. Levels of secreted MCP-1 in culture media were determined by ELISA. Western blot was performed to determine fibronectin, E-cadherin, α-smooth muscle actin (α-SMA) and CCR2 protein expression.
Results : MCP-1 protein levels were significantly increased in HG-conditioned media compared to LG media (p<0.05). CCR2 protein was expressed in HPMCs, but there was no difference between LG- and HG-stimulated cells. α-SMA protein expressions in HG and LG+MCP-1 groups were significantly higher relative to LG cells, while E-cadherin protein expressions were decreased in HG and LG+ MCP-1 groups compared to LG cells (p<0.05). In addition, there were significant increases in fibronectin mRNA and protein expression in HG and LG+MCP-1 groups (p<0.05). These HG-induced changes were significantly abrogated upon pre-treatment with RS102895.
Conclusion : HG and MCP-1 directly induce EMT and enhance fibronectin expression in HPMCs, and these HG-induced changes were attenuated by the inhibition of MCP-1/CCR2 system, suggesting that increased MCP-1 levels by HG may contribute to the development of peritoneal fibrosis.

참고자료

· 없음