Serratia plymuthica AL-1이 생산하는 chitinase에 의한대파 흑색썩음균핵병균의 생육억제

서지정보

· 발행기관 : 한국생명과학회
· 수록지 정보 : 생명과학회지 / 13권 / 1호 / 90 ~ 98페이지
· 저자명 : 김진호, 최용화, 강상재, 김영훈, 주길재

초록

대파 흑색썩음균핵병균 (Sclerotium cepivorum)에 길항력을 가진 Serratia plymuthica L-1의 길항 메카니즘을 조사하기 위해 S. plymuthica L-1이 생산하는 세포외 chitinase를 정제하여 그 특성을 조사하였다. Colloidal chitin이 함유된 배지에서 생산된 S. plymuthica L-1 chitinase는 (NH4)2SO4 40∼70% precipitation, affinity adsorption, DEAE-sephadex A-50 column chromatography, 및 sephadex G-200 column filtration 과정을 통하여 정제하였다. 정제된 chitinase는 7.3% 회수율과 19.8의 정제도를 나타내었으며, 전기영동시 단일밴드를 얻었으며, 분자량은 55kDa로 나타났다. 정제된 chitinase의 최적 pH 및 온도는 5.5, 55℃이었고, 온도안정성 조사에서 정제효소는 50℃까지 90%의 잔존활성을 유지하였으나 60℃이상에서는 급격하게 효소활성이 실활되었다. Ca2+, Mn2+, Mg2+ 등의 이온은 대략 20% 이상의 효소를 활성화시켰으나 Cu2+ 이온은 약 80%의 효소활성을 억제시켰고, SDS, p-CMB, MIA 등도 효소활성을 저해하는 작용을 하였으며, colloidal chitin에 대한 Km값은 3.26 ㎎/㎖로 나타났다. 정제효소에 의한 각종 병원균에 대한 생육억제정도는 흑색썩음균핵병균, 고추 검은무늬병균, 고추 탄저병균, 도라지 줄기마름병균 , 고추 흰별무늬병균, 오이 균핵병균, 수박 덩굴쪼김병균 등에는 길항력을 나타내었으나 고추 역병균과 무 모잘록병균에서는 길항력이 아주 낮게 나타났다. 정제 chitinase에 의해 대파 흑색썩음균핵병균 S. cepivorum의 균사는 팽창과 균사 끝의 용균, 분해 및 변색현상을 관찰할 수 있었고 chitinase 기능과 lysozyme 기능을 모두 가지고 있을 것으로 추정된다.

참고자료

· 없음