파골세포의 분화와 뼈 흡수에 미치는 칡(Pueraria lobata)의 영향 (The Effects of Pueraria lobata on Osteoclast Differentiation and Bone Resorption)

서지정보

· 발행기관 : 대한체질인류학회
· 수록지 정보 : 해부·생물인류학 / 27권 / 4호 / 187 ~ 196페이지
· 저자명 : 백종민, 윤강휴, 안성준, 박선향, 천윤희, 김주영, 오재민

초록

칡은 뼈소실 모델인 난소를 적출한 마우스와 랫드에서 뼈형성을 촉진하다고 밝혀진 바 있다. 그러나뼈파괴세포의 분화와 뼈흡수능에 미치는 칡의 효과와 기전은 아직 밝혀지지 않았다. 그러므로 본 연구에서는칡이 recetor activator of nuclear factor-κB ligand (RANKL)과 macrophage colony stimulating factor (M-CSF)로 유도한 뼈파괴세포의 분화에 미치는 효과와 그 기전을 연구하였다.
우선적으로 뼈파괴세포 분화에 억제효과를 확인하기 위하여 마우스에서 분리한 큰포식세포에 칡을 농도별로처리하여 tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) staining을 시행하였다. 또한 칡이 작용하는 기전을 알아보기위하여 western blot 분석과 RT-PCR을 시행하였고, 성숙한 뼈파괴세포의 뼈흡수능에 미치는 영향을 알아보고자hydroxyapatite 플레이트로 실험을 진행하였다.
그 결과, 칡은 뼈파괴세포 분화단계의 필수적인 초기 신호전달경로인 p38, Akt, c-Jun N-terminal kinase (JNK),IκB의 인산화를 억제하였다. 또한 nuclear factor of activated T cells (NFAT)c1과 c-Fos의 비활성화를 유도함으로써 뼈파괴세포와 관련된 유전자인 osteoclast-associated receptor (OSCAR), TRAP, Integrin β3, osteoclaststimulatory transmembrane protein (OC-STAMP), dendritic cell-specific transmem-brane protein (DC-STAMP)의발현을 저해하였다. 특히, hydroxyapatite로 코팅된 플레이트를 통해서 뼈흡수능을 억제하는 칡의 효과를 확인하였으며, 이와 깊은 연관성을 가지는 유전자인 Cathepsin K의 발현 또한 저해하였다.
이러한 결과를 통하여 뼈파괴세포 분화와 뼈흡수능을 저해하는 칡의 효과와 이와 관련된 분자적 기전에 대하여 규명하였다.

영어초록

Previous researches have proved that Pueraria lobata up-regulates bone mineral contents and bonemineral density in bone-loss model, ovariectomized mice and orchidectomized rats. However, the precise effectsand mechanisms of Pueraria lobata on osteoclast differentiation and bone resorbing activity of mature osteoclastsstill remains unknown. Therefore, we investigated the effect and mechanism of Pueraria lobata on receptor activatorof nuclear factor-κB ligand (RANKL) and macrophage colony stimulation factor (M-CSF)-inducedosteoclast differentiation in bone marrow macro-phages (BMMs). First of all, we treated BMMs derived frommice with various concentrations of Pueraria lobata in order to perform screening by tartrate-resistant acidphosphatase (TRAP) staining. Also, we conducted western blotting and RT-PCR for the purpose of verifying thetreatment mechanism of Pueraria lobata and lastly, we used hydroxyapatite-coated plate to evaluate the effects ofPueraria lobata on bone resorbing activity of mature osteoclasts. As a result, Pueraria lobata has inhibitoryeffect on phosphorylation of p38, Akt, c-Jun N-terminal kinase (JNK), and IκB which are essential early signalingpathway of osteoclastogenesis. Also, the inactivation of nuclear factor of activated T cells (NFAT)c1, and c-Foswhich is caused by Pueraria lobata is followed by the suppression effects of Pueraria lobata on osteoclastrelatedvarious genes, osteoclast-associated receptor (OSCAR), TRAP, Integrin β3, osteoclast stimulatorytransmembrane protein (OC-STAMP), and dendritic cell-specific transmembrane protein (DC-STAMP).
Particularly, Pueraria lobata blocks the formation of pit area on hydroxyapatite-coated plate in a dose-dependentmanner as well as the mRNA expression of Cathepsin K, which is associated with bone resorbing activity. Theseresults demonstrate the molecular mechanism relating to anti-osteoclastogenesis effect of Pueraria lobata as wellas the inhibitory effect of Pueraria lobata on mature osteoclast formation and bone resorbing activity.

참고자료

· 없음