HCV 핵산증폭검사 비교검사의 불일치 결과에 대한 원인 조사 (Determining the Cause of Discrepant Results in HCV NAT Comparative Tests)

서지정보

· 발행기관 : 대한수혈학회
· 수록지 정보 : 대한수혈학회지 / 21권 / 1호 / 36 ~ 42페이지
· 저자명 : 조현진, 이재숙, 허광, 박규은, 조남선, 김명한

초록

배경: 대한적십자사 혈액검사센터에서는 핵산증폭검사 선별검사 최종양성인 검체에 대하여 2005년 2월부터 비교검사를 실시하고 있다. 그런데 2007년과 2008년에 실시한 비교검사에서 HCV 희석검체에 대하여 5건의 불일치 결과가 발생하여 그 원인을 조사하였다.
방법: 불일치 검체 5건에 대해 각 검체당 5개씩 정량 분석하여 HCV RNA양을 확인하였고, 희석검체에 대한 비교검사를 6회 반복검사하여 두 시스템에 대한 저역가 검체의 민감도를 비교하였다. 또한 추가로 불일치 검체에 대한 특징을 검토하고자 유전자형 분석을 실시하였다.
결과: HCV RNA에 대한 정량검사결과 같은 방법의 동일 검체에서는 모두 균일한 결과를 보였다. 정량검사 결과는 평균 1.5E+01 IU/mL∼3.1E+ 03 IU/mL까지의 분포를 보여 모두 저역가임을 확인하였다. 비교검사 결과 1.0E+03 IU/mL 이상의 검체에서는 두 시스템 모두 100% 검출을 하였고, 그 이하의 정량수치를 보이는 검체에 대해서는 두 시스템 모두 100% 완벽한 검출을 보이지 않았다. 5개의 검체로 유전자형 분석을 실시한 결과 증폭이 되지 않는 한 건을 제외하고는 모두 국내에서 보고되는 1b와 2a/2c로 문헌상의 특징과 유사하였다.
결론: 저역가 검체에서는 두 핵산증폭검사 시스템 모두 100% 완벽한 검출이 불가능하였고, 모두 동일한 검출률을 보였다. 특히 HCV의 경우 항체 생성 시기 전후에 급격히 viral load가 떨어져 저역가 상태에 놓일 수 있으며, 이러한 경우 핵산증폭검사에서 검출되지 않을 수 있다. 이는 헌혈자에 대한 HCV 선별검사로서 항체검사와 핵산증폭검사가 병행되어야 함을 보여주는 사례이다. 또한 향후 핵산증폭검사는 pool수를 더 축소한 자동화된 장비의 도입이 고려되어져야 한다.

영어초록

Background: The Korean Red Cross blood laboratory centers have been performing comparative tests for NAT reactive specimens since February 2005. However, five discrepant specimens were found in HCV-diluted specimens between 2007 and 2008 and the reasons for this has been investigated.
Methods: For the five discrepant specimens, the HCV RNA concentration was measured in 5 tubes for each speciment. Subsequently, in order to compare the sensitivity of the low titer specimens measured by RT-PCR and TMA, comparative tests of diluted samples were examined six times per sample. Finally, the genotype was tested in order to determine the characteristics of the discrepant samples.
Results: Result of the quantitative tests for HCV RNA demonstrated that aliquots of the plasma bag were homogenous in term of viral load quantitation. As a result of the comparative test, all samples were found to contain over 1.0×101 IU/mL as detected by the two analytical systems. In contrast, those less than 1.0× 101 IU/mL were not entirely detected by the two systems.
Conclusion: It was impossible to completely detect using the two NAT system and the detection rates for both systems were equivalent for the samples examined. In particular, with respect to HCV, it may be undetectable on the NAT test because viral load decreases rapidly before and after sero-conversion. This result indicates that anti-HCV and NAT should be performed together as an HCV screening test prior to blood donation. (Korean J Blood Transfus 2010;21:36-42)

참고자료

· 없음