건강기능식품공전 시험법의 크로마토그래프법 조건의 조정 및 비타민C에 대한 적용성 평가 연구 (Optimizing analytical method in Health Functional Food code with adjustable chromatographic parameters: A case study of vitamin C)

서지정보

· 발행기관 : 한국분석과학회
· 수록지 정보 : 분석과학 / 37권 / 3호 / 143 ~ 154페이지
· 저자명 : 신정훈, 정유성, 최용석, 한상범, 이동규

초록

건강기능식품공전은 기능성 원료의 지표(기능)성분에 대해 시험법을 고시하고 있다. 본 연구에서는 공전에서 제공하는 비타민C 시험법을 개선하고 정량을 위한 크로마토그래프법 조건의 조정 가능 범위에 대한 데이터를 검토하였다. 우선적으로 이동상 조건인 용매 조성, 염 농도, pH, 컬럼 온도를 조정해 보았으며, 특히 pH의 조절에 따라 완충용액으로부터 유래한 피크가 목적 성분인 비타민C와 명확히 분리될수 있음을 개선된 시험법으로 확인하였다. 고정상 규격인 컬럼 내경, 컬럼 길이 및 고정상 입자 크기의 조정에 따라 성분의 머무름시간이 일부 조정되었으나, 이론단수는 유사한 수치를 나타냄으로써 목적 성분의분리 및 정량적 분석에 영향을 주지 않았다. 변경된 컬럼 규격에 따른 유량 변경식은 USP <621> Chromatography 및 국내 식품의약품안전처의 [의약품 등 시험방법 밸리데이션 가이드라인 해설서]에서 제시하는 공식을 근거로 컬럼 규격(내경, 길이, 입자 크기)을 고려한 새로운 공식을 도출하였으며, 비타민 복합제에 대한 적용성 평가 결과, 변경된 고정상 및 유량에도 비타민C에 대한 높은 선택성을 보였다. 결론적으로, 크로마토그래프법 조건 일부의 변경을 통해서 비타민C를 최적으로 분리 및 검출할 수 있음을 확인하였으며, 등용매 용리를 활용하는 시험법에서 액체크로마토그래피의 이동상 및 고정상 조건을 조정 가능함을 확인하였다.

영어초록

In this study, we improved the vitamin C test method and reviewed data on the adjustable range of chromatography conditions for quantification. First, we adjusted the mobile phase conditions such as solvent composition, salt concentration, pH and column temperature and in particular, it was confirmed through an improved test method that the peak derived from the buffer solution could be clearly separated from the target component, vitamin C by adjusting the pH. The retention time of vitamin C was partially changed by adjusting the column diameter, length and particle size but the number of theoretical plates indicated similar values and did not affect the separation and quantitative analysis of the target component.
The flow rate according to the column specifications was derived from the equation proposed by the U.S. FDA (Food and Drug administration) and the Korean MFDS (Ministry of Food and Drug Safety), and evaluation of the applicability to vitamin complexes showed high selectivity for vitamin C even with altered stationary phase conditions and flow rates. In conclusion, vitamin C can be optimally separated and detected by changing the chromatographic method conditions and it was confirmed that the mobile and stationary phase conditions of liquid chromatography can be slightly adjusted in case the assay method uses an isocratic elution.

참고자료

· 없음