면역능력이 저하된 소아에서 Multiplex RT-PCR에 의한 비인두 상주균 검출의 의의 (The Clinical Significance of Nasopharyngeal Carriages in Immunocompromised Children as Assessed)

서지정보

· 발행기관 : 대한혈액학회
· 수록지 정보 : Blood Research / 44권 / 4호 / 220 ~ 226페이지
· 저자명 : 김경희, 신지혜, 김선영

초록

배경: 호흡기 감염의 증상이 없는 면역능력이 저하된 환아들을 대상으로 다중 역전사중합효소연쇄반응법(multiplex reverse transcription-polymerase chain reaction; mRT-PCR)을 이용하여 비인두 상주균의 이환율을 알아보고자 하였다.
방법: 2008년 5월 22일부터 25일까지 33명의 소아들을 대상으로 비강 면봉채취법으로 검체를 채취하였으며, 이들은 검체 채취 당시 심각한 호흡기 감염의 증상이 없었다. 모아진 검체에서 cDNA를 추출한 후 multiplex primer set (SeeplexⓇ PneumoBacter ACE Detection, Seegene, Seoul, Korea)로 PCR을 진행하였다. 증폭된 반응산물은 2% agarose gel과 전기 영동 자동화 시스템인 screentape system (Lab901, Scottland, UK)에 각각 전기 영동하여 확인하였다.
결과: 전체 42명의 환아들 중 남아는 24명 여아는 18명이었으며, 나이는 1.2세에서 16.3세로 중앙값은 9.2세였다. mRT-PCR 결과 28명(66.6%)의 소아들에서 양성을 보였으며(S. pneumoniae, H. influenzae, C. pneumoniae, B. pertussis), 이들 중 4명(14.3%)에서 2가지 이상의 균이 검출되었다. 균의 종류로는 2명에서는 두 가지 세균이(S. pneumoniae와 H. influenzae, H. influenzae와 B. pertussis) 두 명에서는 세 가지 세균이(S. pneumoniae, B. pertussis와 C. pneumoniae, C. Pneumoniae, H. influenzae와 B. pertussis) 동시에 검출되었다.
결론: mRT-PCR은 비인두 상주균의 동정에 있어서 균 배양 검사보다 민감도가 높은 방법으로 생각된다. 하지만 비인두 상주균에 대한 PCR 결과가 면역능력이 저하된 소아들의 임상 양상과 어느 정도 일치할지에 대해서는 더 많은 연구가 필요할 것으로 생각된다.

영어초록

Background: The aim of this study was to determine the prevalence of asymptomatic nasopharyngeal carriages in immunocompromized children by using a multiplex reverse transcriptase-polymerase chain reaction (mRT-PCR) assay kit.
Methods: We obtained clinical samples by nasopharyngeal swabs from 42 patients with underlying immune deficiency from May 20, 2008 to May 22, 2008. The children were free from signs of respiratory tract infections at the time of sampling. Isolated cDNA was extracted and after this the DNA was examined using a multiplex primer set for pneumonial bacteria detection (SeeplexⓇ PneumoBacter ACE Detection, Seegene, Seoul, Korea). The amplified PCR products were separated on 2% agarose gels and stained with ethidium bromide and a screentape system (Lab901, Scottland, UK) and then they were compared. The nasopharyngeal swab culture was done simultaneously and this was compared with the results of mRT-PCR.
Results: A total of 42 patients (males: 24, females: 18) aged between 1.2 and 16.3 years (median: 9.2 years) were included in this study. The mRT-PCR detected bacteria (Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Chlamydia pneumoniae, and Bordetella pertussis) in 28 patients (66.6%). Of these 28 patients, 4 patients (14.3%) showed more than 2 bacteria: 2 patients were positive for two bacteria (S. pneumoniae and H. influenzae, H.influenzae and B. pertussis) and 2 patients were positive for three bacteria (S. pneumoniae, B. pertussis and C. pneumoniae, C. Pneumoniae, H. influenzae and B. pertussis). S. pneumoniae was cultured in one patient (2.4%).
Conclusions: The mRT-PCR is a sensitive tool for the detection of the asymptomatic nasopharyngeal carriages. The clinical significance of the bacteria detected in immunocompromized patients by mRT-PCR will need further evaluation.

참고자료

· 없음