(A+만점레포트)[화공생물공학단위조작실험2] 5.PCR을 활용한 유전자 증폭(결과)

소개

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목차

1. 시약 세부
2. 결과
3. 고찰
*Reference

본문내용

<중 략>

Protease(프로테아제)란 단백질 분해효소로, 단백질을 구성하는 아미노산 간의 펩티드 결합을 가수분해하여 아미노산이나 펩타이드 혼합물을 만드는 효소를 말한다. 펩신, 펩티데이스, 트립신 등이 있다. 본 실험에서는 구강 내 상피세포로부터 DNA를 추출하기 위해 사용된다.
Ethanol의 분자량은 46.0684, 녹는점은 -114.1 ℃, 끓는점은 78.5 ℃로 비슷한 분자량을 갖는 탄화수소들과 비교하여 녹는점과 끓는점이 높다. 또한 에탄올은 휘발성이 있기 때문에 쉽게 기화되고, 물과 알코올 등의 용매와 잘 섞인다. 이러한 특징으로 본 실험에서 에탄올은 단백질을 응고시켜 소독, 살균하고 남아 있는 염을 제거하는 역할을 하며 70%일 때 최대 살균력을 가진다.
DNA marker와 agarose gel는 전기 영동 시 사용된다. DNA marker는 DNA 샘플의 크기를 추정하기 위해 사용하며 그 종류는 다양하다. 분석하고자 하는 DNA 크기에 따라 범위를 적당한 범위를 선정하는 것이 필요하다. DNA marker를 첨가한 시료는 agarose gel을 통해 loading한다. Agarose는 파우더 형태의 다공성 구조이며, DNA분자를 크기에 따라 분류하는데 사용된다. 일반적으로 아가로스의 농도가 높을수록 구멍의 크기는 작아지므로 적절한 아가로스 농도를 선택한다.
마지막으로 DNA를 침전시키기 위해서는Na+가 필요하다. 1가 양이온은 DNA의 인산 디에스테르결합에서 음전하를 띠는 인산에 결합하여 DNA의 charge를 blocking 한다. Sodium acetate를 이용하여 DNA 사슬 간의 반발력을 감소시킴으로써 DNA가 잘 뭉치고 침전되도록 하며, 무색인 DNA가 흰색을 띠도록 한다.

참고자료

· 동국대학교 교수진, “화공생물공학 단위조작실험2”, 동국대학교, 2025, pp.44-48.
· 우정임, “DNA, 유전자, “단백질의 통합적 이해를 위한 분자생물학 탐구 실험 프로그램 개발 및 적용; ALDH2 다형성을 중심으로”, 2015, pp.32-33.
· 예성수, “RT-PCR 기법을 이용항 mRNA의 정량”, 인제대학교 백병원, 2002, pp.29-32.