[약대 실습 레포트] 면역학 실습 레포트_면역세포의 분리 확인(cell surface staining)

소개

PEET 고득점으로 약학대학 입학 후 현 약사입니다.
약학대학 편입 준비생, 올림피아드 준비생, 기타 편입학 준비생들에게 도움이 되는 자료를 업로드합니다

비장세포를 염색하고 유세포 분석(FACS)을 통해 lymphocyte중 CD4+, CD8+ T celldㅢ 비율을 알아보는 면역학 실습 레포트입니다
실험기법과 실험 결과 사진, Discussion까지 상세히 나와있습니다.

목차

1. introduction
1) Immunofluorescence Microscopy
2) CD4 T cell과 CD8 T cell
3) 유세포 분석과 형광

2. Protocol
1) Materials
2) Procedure

3. Result

4. Discussion

5. Assignment

6. References

7. Pre-study

본문내용

1) Immunofluorescence Microscopy
형광 항체 현미경은 cell이나 tissue 내의 target protein을 detection하는 immunohisto chemistry 의 한 방법으로, enzyme을 사용하는 것이 아니라, fluorophore가 결합된 항체를 이용하여 형관 현미경을 이용해 target protein 위치를 detection하는 방법이다. 형광 dye는 특정 파장의 빛을 흡수하며 그 파장대에 따라 보색을 나타낸다. 형광항체법은 첫째, 직접형광 항체법이 있는데, 형광물질을 표시한 항체를 항원에 결합시킨 후, 형광현미경으로 형광 물질을 관찰하는 방법이 다. 둘째로, 간접형광항체법은 항원과 결합할 수 있는 형광무표지 항체를 반응시키고, 일차 항 체의 isotype에 반응하는 형광 표지 이차항체를 반응시킨 후, 형광 현미경으로 형광물질을 관찰 하는 방법이다.
2) CD4 T cell과 CD8 T cell
세포성 면역의 주요 세포인 T cell은 흉선에서 유래하는 림프구로, naive T cell은 항원과 반응하 면 cytokine을 생성하며 증식이 일어나고 활성화된 T cell로 분화한다. 활성화된 T cell은 세포 표 면에 있는 단백질 분자에 의해 구분되며, Tc cell은 CD8+, Th cell은 CD4+, Treg은 CD4+, CD25+이 다.
3) 유세포 분석과 형광
유액 상태의 입자나 세포가 일정 감지지역(sensing point)를 통과할 때, 각각의 입자나 세포를 신속하게 측정하여 한 세포가 갖는 여러 특징(세포의 크기, 세포의 내부 조성정도, 세포기능인 지 등)을 동시에 측정하고 경우에 따라 특정한 세포만을 선택하여 분리할 수 있는 장비다. 형광 항체법은 매우 가치 있는 정성적인 도구지만 정량적 자료를 제시하지는 못하는데, 이러한 단점 은 형광항체로 염색된 세포를 자동으로 분리·분석하도록 고안된 유세포 분석기의 개발로 개선 되었다.

참고자료

· 면역학 실습 2주차 수업자료
· 최신면역학(2nd Ed), 감염미생물, 면역약학 분과학회, 라이프 사이언스