[약학실습 A+] 단백질 분리 정제 결과레포트

소개

"[약학실습 A+] 단백질 분리 정제 결과레포트"에 대한 내용입니다.

목차

1. 실험주제

2. 실험목적

3. 이론
가. Fast Protein Liquid Chromatography (FPLC)
나. Size Exclusion Chromatography (SEC)
다. Ultraviolet-Visible Spectroscopy (UV-Vis Spectroscopy)
라. Beer’s Law

4. Materials
가. 시료
나. 실험기구

5. 실험방법

6. 결과
가. 흡광도 그래프
나. UV spectroscopy를 이용한 농도 측정

7. 결론 및 고찰
가. 단백질의 흡광도
나. 분리된 peak의 단백질 구분
다. peak 겹침
라. 수득률
마. 흡광도와 농도의 관계

본문내용

1. 실험주제
단백질 분리 정제

2. 실험목적
Size Exclusion Chromatography의 원리를 이해하고 이를 이용하여 단백질 혼합 샘플을 분리 정제한다. UV spectroscopy를 활용해 분리된 sample의 농도를 측정하 고 수득률을 계산할 수 있다.

3. 이론
가. Fast Protein Liquid Chromatography (FPLC)
단백질 혼합물을 분석하거나 정제하는 데 자주 사용되는 액체 크로마토그래피의 한 형태로, 이동상은 수용성 완충 용액이다. 단백질의 대량 순수 분리 및 분석 장비이며 고정상과 이동상 간의 상호작용에 의해 단백질이 단일 물질로 분리되어 검출기에 검 출된다. 분석속도는 HPLC에 비해 느리지만, 다양한 컬럼을 사용할 수 있으므로 분 리, 정제할 수 있는 단백질의 종류가 더 다양하다는 장점이 있다.

나. Size Exclusion Chromatography (SEC)
Gel Filtration Chromatography라고도 불리는 크기배제 크로마토그래피는 용액 내 분자를 크기에 따라 분리하는 크로마토그래피 방법이다. 컬럼은 일반적으로 덱스트란, 아가로스, 폴리아크릴아미드 등의 폴리머로 구성된 다공성 비드로 채워져 있다. 이 구 멍들은 큰 분자들은 배제하고 작은 분자들만 통과시키므로 큰 분자는 구멍에 들어가 지 못하여 컬럼을 빠르게 빠져나온다. 반면 작은 분자는 구멍 안을 이리저리 통과하 므로 컬럼을 상대적으로 느리게 빠져나옴으로써 분자가 크기에 따라 분류되는 것이 다.

다. Ultraviolet-Visible Spectroscopy (UV-Vis Spectroscopy)
전자기 스펙트럼의 자외선 및 인접 가시 영역의 일부에 대한 분광법으로, 샘플이 UV-Vis 영역에서 흡수되어야 분석 가능하다. 광선을 샘플에 통과시키고 각 파장에서 흡수되는 빛의 양을 측정하는 방식으로 작동하며, 흡수된 빛의 양은 화합물의 농도에 비례한다.

참고자료

· 없음